Molecular analysis and overcoming of drug resistance to microtubule inhibitors

微管抑制剂耐药性的分子分析和克服

• 批准号: 21K10133
• 负责人: 伏見 一章
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10133/
• 关键词: 微小管阻害抗癌剤; 頭頚部悪性腫瘍; 化学療法; 微小管阻害薬剤; 薬剤耐性機構; 克服薬; 口腔癌

微小管阻害抗癌剤は比較的新しい薬剤であり、未だ耐性メカニズムの解明が十分ではないため喫緊の問題である。そこで、薬剤耐性機構を調べる方法として、タキサン系抗癌剤の作用メカニズムである微小管作動性に関係を有するという点を考慮し、まずは特異的に耐性候補遺伝子を絞り込んだ。単なる薬剤の代謝機構では説明できない微小管阻害抗癌剤に特有な薬剤耐性メカニズムを解明することを試みた。微小管阻害抗癌剤を作用させた扁平上皮癌培養細胞中における遺伝子の発現変動を明らかにするため、濃度勾配をかけて培養癌細胞に微小管阻害抗癌剤を作用させ、その細胞からRNAを抽出した。抽出したRNAをMicroarrayにかけて分析し、遺伝子の変動状態を明らかにした。Microarrayの結果の内、特に特徴的な発現変動した遺伝子に関して、Real time PCR法で発現状態を確認した。微小管阻害抗癌剤を使用した臨床サンプルにおける遺伝子の発現変動を明らかにするため、採取した臨床サンプルからRNAを抽出して、Microarrayで注目した遺伝子に関してReal time PCR法で発現状態を確認した。

微管抑制性抗癌剂是相对较新的药物，并且仍然不足以阐明耐药机制。因此，作为检查耐药性机制的一种方法，我们首先考虑了它们与微管活性相关的事实，这是基于紫杉烷基抗癌药物的作用机理的事实。我们试图阐明微管抑制性抗癌药物所特有的耐药性机制，这些机制不能简单地通过仅通过药物代谢机制来解释。为了阐明用微管抑制性抗癌剂在鳞状细胞培养细胞中基因表达的变化，将浓度梯度应用于具有微管抑制性抗癌剂的培养癌细胞，并从细胞中提取RNA。通过微阵列分析提取的RNA，以揭示基因变异状态。在微阵列的结果中，实时PCR证实了表达状态的特殊表达基因。为了阐明使用微管抑制性抗癌药中临床样品中基因表达的变化，从收集的临床样品中提取RNA，并通过实时PCR证实了在微阵列上指出的基因的表达状态。