治療抵抗性口腔癌に対するmt-tRNA修飾を標的とした新たな治療戦略の構築

构建针对难治性口腔癌mt-tRNA修饰的新治疗策略

• 批准号: 21K10099
• 负责人: 高橋 望
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10099/
• 关键词: tRNA修飾; 口腔扁平上皮癌; SAS; ミトコンドリア; 抗癌剤耐性; tRNA修飾; 口腔扁平上皮癌; SAS; ミトコンドリア; 抗癌剤耐性

申請者はこれまでに口腔扁平上皮癌の臨床検体を用いた予備実験にて、周囲正常組織と比較して腫瘍部においてmt-tRNAに存在するms2i6Aが優位に増加している ことを見出していた。さらに抗癌剤耐性口腔癌細胞株において、 親株と比較してms2i6Aが5倍以上に増加していることも見出していた。2021年度にms2i6A修飾酵素で あるCDK5RAP1を抑制した口腔扁平上皮癌細胞株SASにおいて、5-FU投与した際の生細胞数の減少、死細胞数の割合の増加が確認された。また、同様に過去に樹立された5FU耐性口腔扁平上皮癌細胞株FR2-SASを用いてCDK5RAP1を抑制したが、SASと比較して5FUの効果上昇は確認されなかった。また、今回CDK5RAP1を抑制したSASにおいて、ミトコンドリア呼吸鎖複合体のタンパク量減少を認め、ミトコンドリア機能の低下が疑われた。さらに、リン酸化JNKやカスパーゼ3の増加も見られ、アポトーシスを誘導していることが疑われた。さらにi6Aには抗腫瘍効果が存在することが知られており、今回、SASおよびFR2-SASにi6Aを投与することによって増殖能の減少を確認した。

在使用口服鳞状细胞癌的临床标本的初步实验中，申请人发现与周围正常组织相比，MT-TRNA中存在的MS2I6A主要在肿瘤区域增加。此外，发现与母体菌株相比，抗癌口腔癌细胞系中MS2I6A的增加了五倍以上。在2021年，在口服鳞状细胞癌细胞系SA中，抑制了MS2I6A修改的酶CDK5RAP1，生物数量减少，当给药5-FU时，死细胞数量增加。同样，使用先前建立的5FU口服鳞状细胞癌细胞系FR2-SAS抑制CDK5RAP1，但与SAS相比，5FU的效果没有确认。此外，在抑制CDK5RAP1的SA中，观察到线粒体呼吸链复合物的蛋白质含量降低，并怀疑线粒体功能的下降。此外，还观察到磷酸化的JNK和caspase 3的增加，并怀疑它会诱导凋亡。此外，众所周知，I6a具有抗肿瘤作用，我们已经确认通过对SAS和FR2-SAS施用I6A来降低其增殖能力。