細胞治療による鼻副鼻腔粘膜再生医療ーラット粘膜傷害モデルへの細胞シート移植検討

细胞疗法鼻窦粘膜再生医学-细胞片移植大鼠粘膜损伤模型的研究

• 批准号: 21K09619
• 负责人: 鴻 信義
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09619/
• 关键词: 副鼻腔炎; 粘膜再生; 細胞治療; 細胞シート; 細胞動態; 再生医療; 移植後動態; 副鼻腔炎; 粘膜再生; 細胞治療; 細胞シート; 細胞動態; 再生医療; 移植後動態

副鼻腔疾患において早期の上皮化や病的粘膜細胞自体の置換が細胞治療により行われれば病態の再燃を防げる可能性があると考えた。幹細胞レベルの置換が行われれば治療効果はかなりの長期間に及ぶと考えた。本研究では、細胞治療を用いた鼻粘膜再生医療に向けて移植細胞の生着状況、生着後の動態、適切な細胞ソース・細胞グラフトの検討を行う。具体的には、GFPトランスジェニックラット由来の細胞シートを作製し、ヌードラットの鼻粘膜傷害部位に移植することで評価する。細胞シート作製：温度応答性培養皿は温度変化により細胞が自発的に脱着する。細胞をコンフルエントな状態にまで培養した後に温度を下げることにより培養細胞全体を一枚の細胞シートとして回収できる。この技術は様々な分野で研究および臨床応用が行われている。本研究ではラットより採取した鼻粘膜をエクスプラント培養し鼻粘膜上皮細胞を回収する。その後、温度応答性培養皿に細胞を播種し1週間継代培養後に温度降下により鼻粘膜上皮細胞シートを回収する。GFPラットより採取した細胞より鼻粘膜上皮細胞シート作製が可能となった。ラット鼻粘膜損傷モデル：外切開で鼻骨(右図1)を除去後に鼻粘膜を剥離することにより粘膜損傷モデルを作製する。ラットの粘膜剥離部位は鼻中隔の粘膜剥離モデルを作製し検討する。SDラットを用いて粘膜剥離部位の検討を行った。ラット鼻粘膜損傷モデルに対する細胞シート移植：上記の鼻粘膜損傷部位に細胞シートを移植する方法を確立した。

我们认为，如果进行细胞疗法，则早期上皮化和替代病理性粘膜细胞本身可以防止病理状况的复发。我们认为，如果进行干细胞水平的置换，则治疗效果将持续很长时间。在这项研究中，我们将研究移植细胞的植入状态，植入后的动力学以及使用细胞疗法的适当细胞源和细胞移植物进行鼻粘膜再生药物。具体而言，通过将其植入裸大鼠的鼻粘膜损伤部位来制备和评估来自GFP转基因大鼠的细胞表。细胞片制备：在温度响应性培养皿中，由于温度变化，细胞会自发解吸。通过降低细胞培养至汇合状态后的温度，可以将整个培养的细胞作为单个细胞片回收。该技术正在研究并在各种领域进行临床应用。在这项研究中，从大鼠收集的鼻粘膜在爆炸性培养中培养，并收集鼻粘膜上皮细胞。之后，将细胞播种在温度响应性培养皿中，在亚培养后一周后，通过温度下降收集鼻粘膜上皮细胞表。从GFP大鼠收集的细胞中，鼻粘膜上皮细胞表已成为可能。大鼠鼻粘膜损伤模型：通过外部切口去除鼻骨（右图1）而创建粘膜损伤模型，然后剥离鼻粘膜。将准备一个大鼠粘膜脱落部位的鼻中隔的粘膜脱落模型。使用SD大鼠检查了粘膜脱离部位。大鼠鼻粘膜损伤模型的细胞板植入：已建立了上述鼻粘膜损伤部位植入细胞表的方法。