Analysis of the mechanism of anti-tumor immunosuppression by peritoneal mesothelial cells phagocytosed with ovarian cancer cells and investigation of the method for reactivation anti-tumor immunity

腹膜间皮细胞吞噬卵巢癌细胞抗肿瘤免疫抑制机制分析及重新激活抗肿瘤免疫方法研究

基本信息

批准号：
21K09492
负责人：
小屋美博
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09492/
关键词：
卵巣癌中皮細胞抗腫瘍免疫

项目摘要

腹腔内の最大の構成要素である中皮細胞は、貪食能を有している。近年、貪食細胞の重要性が、神経損傷をはじめ様々な分野で報告されている。本課題では、(1)腹膜中皮細胞の卵巣癌細胞に対する貪食機能の解析を行い、(2)その結果、腹膜中皮細胞にどの様な変化が生じるのかを評価する。(3)そして、その変化が腫瘍微小環境へどのような影響を及ぼすのかを明らかにし、(4)宿主の腫瘍免疫を再賦活化する方法の探索を行う。令和４年度は、前年に引き続き(1)及び(2)を中心に遂行した。不死化したマウス由来中皮細胞と同系のアポトーシス誘導マウス卵巣癌細胞を共培養し、貪食性中皮細胞をFACSにより分取し、分取した貪食性中皮細胞からRNAを抽出し、免疫関連遺伝子の発現を定量的PCRにより解析した。これらの結果、定量的PCR解析では、免疫関連遺伝子及び脂質代謝関連分子の有意な発現変化が確認された。免疫抑制誘導分子の発現が増加し、一方、免疫共刺激遺伝子の発現が減少していた。これらの結果から、細胞片を貪食した中皮細胞は免疫抑制を誘導する性質があることが示され、卵巣癌細胞の宿主免疫系からの逃避に寄与している可能性が示唆された。また、本課題が予定通り進まない時に備え、癌関連中皮細胞（CAM）による宿主免疫系の抑制化に関しても準備を進めた。加えて、癌細胞側にも注目し、細胞表面分子であるコンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（Chondroitin Sulfate Proteoglycan 4、CSPG4）、及びCD271の役割に関しての解析も行った。試験管内及びマウス個体内での解析の結果、CSPG4もCD271も癌の悪性化に寄与することが分かった。卵巣癌の新規治療標的として新たな知見をもたらすことが期待された。

间皮细胞是腹膜腔中最大的成分，具有吞噬能力。近年来，在包括神经损伤在内的各种领域中已经报道了吞噬细胞的重要性。在这一主题中，我们将分析腹膜间皮细胞对卵巢癌细胞的吞噬功能，（2）评估腹膜间皮细胞中发生了什么变化。（3）然后我们将阐明这些变化如何影响肿瘤微环境，（4）探索重新激活宿主肿瘤免疫力的方法。在2022财政年度，我们按照上一年进行的主要关注（1）和（2）进行了该计划。凋亡诱导的小鼠卵巢癌细胞是合成与永生的小鼠衍生的间皮细胞的，共培养，通过FACS分离吞噬细胞间皮细胞，从分离的吞噬中皮细胞中提取RNA，并从分离的吞噬性吞噬细胞中分析了免疫基因的表达。结果，定量PCR分析证实了免疫相关基因和与脂质代谢相关的分子的表达显着变化。免疫抑制诱导分子的表达增加，而免疫刺激基因的表达降低。这些结果表明，吞噬细胞碎片的间皮细胞具有诱导免疫抑制的特性，这表明它们可能有助于卵巢癌细胞从宿主免疫系统中逃脱。此外，已经通过癌症相关的间皮细胞（CAM）进行了有关抑制宿主免疫系统的准备工作，以准备该问题不按计划进行。此外，我们还专注于癌细胞侧，并分析了细胞表面分子软骨素硫酸盐蛋白蛋白聚糖4（CSPG4）和CD271的作用。在体外和小鼠个体中的分析表明，CSPG4和CD271均导致癌症的恶性转化。希望它能将新发现作为卵巢癌的新目标。