膀胱癌におけるステージ特異的胚性抗原の病的意義の解明と治療効果予測モデルの構築

阐明膀胱癌阶段特异性胚胎抗原的病理意义并构建治疗效果预测模型

• 批准号: 21K09403
• 负责人: 宮田 康好
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09403/
• 关键词: 膀胱癌; ステージ特性胚性抗原; 効果予測因子; SSEAs; シスプラチン; ゲムシタビン; ステージ特異的胚性抗原; 癌幹細胞; 動物モデル

胚性および癌幹細胞のマーカーとして知られるステージ特性胚性抗原（stage-specific embryonic antigen; SSEA)-3、-4、-5の膀胱癌における発現と、その臨床病理学的意義、さらには、抗がん剤や免疫療法に対する治療抵抗性の獲得における働きについて、細胞株、動物モデル、そして、膀胱癌患者の臨床検体を用いて解析する計画を立てた。今回の研究では、SSEA-4の発現を制御した膀胱癌細胞株の樹立に成功し、その安定的な培養を可能とした。そして、その安定株の遺伝的、分子生物学的特性をPCRやウエスタンブロッティングを用いて解析した。さらに、SSEA-4と同様の手法を用いて、SSEA-3およびSSEA-5についても膀胱細胞株での発現を制御する手技に関する研究を行った。膀胱癌患者の摘出した癌組織を用いた研究では、SSEA-4の発現を免疫組織学的手法で半定量化する手技を確立し、実際に数十検体でその発現と臨床病理学的特徴および抗がん剤の効果との関連を検討した。その結果、SSEA-4はhigh grade癌や筋層浸潤癌でlow grade癌や筋層非浸潤性癌よりも高発現していることが分かった。また、術前化学療法を行った患者において、SSEA-4の発現と術前治療による癌細胞の変性の関連を検討したところ、SSEA-4を高発現していた患者では、化学療法後の細胞変性や細胞死は最小限に留まり、その抗腫瘍効果が十分でない患者で高発現していたことが示唆された。一方、術前化学療法が著効した（細胞死が顕著に得られた）患者ではSSEA-4の発現を認めなかった。このように、SSEA-4の発現が抗がん剤の抗腫瘍効果の予測因子になる可能性が示唆された。なお、SSEA-3、SSEA-5については、臨床検体において免疫組織学的に解析するための手技を検討した。

阶段特异性胚胎抗原（SSEA）-3、-4和-5（被称为胚胎干细胞和癌症干细胞的标志物）在膀胱癌中的表达及其临床病理意义，以及我们计划分析其使用膀胱癌患者的细胞系、动物模型和临床标本获得对癌症药物和免疫疗法的治疗耐药性中的作用。在本研究中，我们成功建立了SSEA-4表达受到控制的膀胱癌细胞系，使其能够稳定培养。然后，利用PCR和Western blotting分析稳定菌株的遗传和分子生​​物学特征。此外，我们还使用与SSEA-4相同的方法，对控制膀胱细胞系中SSEA-3和SSEA-5表达的技术进行了研究。在一项使用从膀胱癌患者中取出的癌组织的研究中，我们建立了一种使用免疫组织学方法半定量 SSEA-4 表达的技术，并实际研究了其表达、临床病理特征以及与抗癌效果的关系。药物。结果显示，SSEA-4在高级别癌症和肌肉浸润性癌症中的表达高于低级别癌症和非肌肉浸润性癌症。此外，在接受术前化疗的患者中，我们调查了SSEA-4表达与术前治疗引起的癌细胞变性的关系，发现在SSEA-4高表达的患者中，化疗后细胞变性和细胞死亡最小，表明抗肿瘤作用在抗肿瘤作用不足的患者中高度表达。另一方面，在术前化疗有效的患者中没有观察到 SSEA-4 表达（实现了显着的细胞死亡）。因此，有人提出SSEA-4表达可能是抗癌药物抗肿瘤作用的预测因子。关于 SSEA-3 和 SSEA-5，我们研究了临床标本的免疫组织学分析技术。