胆管癌の浸潤転移能獲得におけるS100A10の機能解明と治療戦略への展開

阐明S100A10在胆管癌获得侵袭和转移能力中的功能及治疗策略的制定

基本信息

批准号：
21K08795
负责人：
小嶋克彦
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

S100A10の機能解析を行うにあたり、これまで主に遺伝子ノックアウトやノックダウンによる発現抑制を阻害手法として用いてきた。今年度において、がん治療薬剤としての将来的な応用を考慮し、ヒトS100A10を標的とした阻害ナノボディ抗体の取得を目指した。ナノボディ変異体を表面に発現する酵母ライブラリーに対し、蛍光ラベルした組換えS100A10蛋白質を作用させ、結合複合体をFACSにより選択濃縮した。選択5サイクル目のプールには、特に2種のクローンが濃縮されており、これらを抗S100A10高親和性ナノボディ抗体候補とした。続いて、これらをレンチウイルスベクターにより細胞内導入したところ、ナノボディ抗体を発現した大腸がん由来HCT116細胞では、ビメンチンフィラメントが細胞質内に拡がることができず、核周辺に凝集している様子が観察された。これは、ビメンチンの発現そのものが抑制される表現型を示すS100A10ノックアウト細胞の場合と異なるものであった。また、多核化した細胞の増加が観察されたことから、S100A10阻害による細胞分裂への影響が示唆された。一方、ナノボディ抗体転移阻害の評価を明確なものにするために既存の盲腸－肝転移マウスモデル系の高効率化を企画した。盲腸移植後に肝転移したマウス大腸がん由来CT26細胞を繰り返し盲腸移植することで高転移性細胞株の樹立を試みた。しかし、これまでのところ、移植の繰り返しは、移植部位での造腫瘍性さえ喪失させる結果となっている。

在对S100A10进行功能分析时，它主要用于抑制基因敲除和敲低作为抑制方法的表达抑制。今年，我们旨在购买针对人类S100A10的抑制性纳米抗体，并考虑到将来作为癌症治疗剂的应用。表达表面上表达纳米病变突变体的酵母库经过荧光标记的重组S100A10蛋白，并选择结合复合物并由FACS浓缩。两个克隆在第五周期的池中特别富集，这些克隆被用作抗S100A10高亲和力纳米抗体的候选物。随后，当使用慢病毒载体将它们引入细胞时，观察到波形蛋白丝无法扩散到源自结肠癌的HCT116细胞中，该结肠癌表达了纳米病毒抗体，并且它们在核周围聚集。这与S100A10基因敲除细胞不同，后者表现出一种表型，其中波形蛋白表达本身被抑制。此外，观察到多核细胞的增加，这表明S100A10抑制对细胞分裂的影响。另一方面，为了澄清纳米抗体转移抑制的评估，我们计划提高盲肠 - 肝转移的现有小鼠模型系统的效率。我们试图通过反复移植来自盲肠移植后转移肝脏的小鼠结肠癌的CT26细胞来建立高度转移的细胞系。但是，到目前为止，重复植入已导致植入部位的肿瘤丧失。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A novel non-a IL-2 elicits potent anti-tumor activity in mice by improving the effector to regulatory T cell balance

一种新型非 a IL-2 通过改善调节性 T 细胞平衡的效应子在小鼠中引发有效的抗肿瘤活性

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Maki Kobayashi;Naoko Ogama;Katsuhiko Kojima;Tatsuro Fukuhara;Nobuyuki Tanaka
通讯作者：
Nobuyuki Tanaka

Tyro3-Gas6およびTyro3-Protein S複合体は、リン脂質結合によりCD63陽性エクソソームを細胞内に取り込む

Tyro3-Gas6 和 Tyro3-Protein S 复合物通过磷脂结合将 CD63 阳性外泌体导入细胞

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
小山昂志;小嶋克彦; 前田昂樹;竹下敏一;森田英嗣 ;田中伸幸
通讯作者：
田中伸幸

S100A10 regulates proliferation and migration of HNSCC cells through cytoskeleton control

S100A10通过细胞骨架控制调节HNSCC细胞的增殖和迁移

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Naoko Ogama;Katsuhiko Kojima;Takayuki Imai;Maki Kobayashi;Kazuto Matsuura,　Nobuyuki Tanaka
通讯作者：
Kazuto Matsuura,　Nobuyuki Tanaka