マルチステップ作用を特徴とする革新的アミロイドーシス治療薬の開発

开发具有多步骤作用的创新淀粉样变性疗法

• 批准号: 21J11627
• 负责人: 井上 雅理
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-28 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21J11627/
• 关键词: デンドリマー; シクロデキストリン; shRNA; ポリプレックス; アルツハイマー病; トランスサイレチン; アミロイドβ; アミロイドーシス

シクロデキストリン修飾デンドリマー (CDE) に、Aβ 産生酵素 (BACE1) を標的とした shRNA (shBACE1) を混合し、CDE/shBACE1 複合体を調製後、以下の研究を実施した。(1) アルツハイマー病 (AD) に対する CDE/shBACE1 の治療効果 (in vitro). まず、マウス神経芽腫由来 Neuro-2a 細胞に対して、CDE/shBACE1 をトランスフェクションした結果、BACE1 mRNA レベルを有意に減少することが示唆された。次に、Neuro-2a 細胞に Aβ42 および CDE/shBACE1 を処理した結果、CDE/shBACE1 は、細胞培養液中で Aβ42 アミロイドの細胞毒性を減弱させる可能性が示唆された。(2) AD に対する CDE/shBACE1 の in vivo 治療効果 (in viro). AD の病態後期モデルであるヒト APP Knock-in マウス (12 カ月齢) に対して、CDE/shBACE1 を 1 週間に 1 回、三種混合麻酔下、脳室内投与した結果、投与部位近傍の標的タンパク質の発現を約 10 % 抑制することが示唆された。また、脳内 Aβ の発現をコントロール群と比較して、有意に抑制することが示唆された。さらに、本化合物を投与した条件において、体重、組織重量および脳内炎症サイトカインレベルのいずれも顕著な変化は観察されなかった。3. 種々のアミロイドーシスに対する CDE/shRNA のin vitro 治療効果CDE/shRNA 複合体は、インスリンおよびβ2-ミクログロブリンのアミロイド形成を阻害することが示唆された。また、あらかじめアミロイドを形成させた条件においても、CDE/shRNA 複合体は、アミロイド量を減少させることが示唆された。

将环糊精修饰的树枝状大分子（CDE）与靶向Aβ产生酶（BACE1）的shRNA（shBACE1）混合以制备CDE/shBACE1复合物后，我们进行了以下研究。 (1)CDE/shBACE1对阿尔茨海默病(AD)的治疗效果(体外) 首先，将CDE/shBACE1转染至小鼠神经母细胞瘤来源的Neuro-2a细胞中，结果表明BACE1 mRNA水平显着降低。表明这种减少。接下来，用 Aβ42 和 CDE/shBACE1 处理 Neuro-2a 细胞的结果表明，CDE/shBACE1 可以减弱细胞培养基中 Aβ42 淀粉样蛋白的细胞毒性。 (2)CDE/shBACE1对AD的体内治疗效果(体外)对人类APP敲入小鼠(12个月大)施用CDE/shBACE1，这是AD的晚期模型。在三重混合麻醉下，注射部位附近的靶蛋白表达被抑制约 10%。还表明，与对照组相比，大脑中 Aβ 的表达显着受到抑制。此外，在施用本发明化合物的条件下，未观察到体重、组织重量或脑内炎性细胞因子水平的显着变化。 3. CDE/shRNA对各种淀粉样变性的体外治疗作用 CDE/shRNA复合物被认为可以抑制胰岛素和β2-微球蛋白淀粉样蛋白的形成。此外，即使在淀粉样蛋白提前形成的条件下，CDE/shRNA复合物也被认为可以减少淀粉样蛋白的量。

项目成果

Multifunctional Therapeutic Cyclodextrin-Appended Dendrimer Complex for Treatment of Systemic and Localized Amyloidosis

用于治疗系统性和局部淀粉样变性的多功能治疗性环糊精附加树枝状聚合物复合物

• DOI: 10.1021/acsami.2c09913
• 发表时间: 2022
• 作者: Inoue M; Higashi T; Hayashi Y; Onodera R; Fujisawa K; Taharabaru T; Yokoyama R; Ouchi K; Misumi Y; Ueda M; Inoue Y; Mizuguchi M; Saito T; Saido TC; Ando Y; Arima H; Motoyama K; Jono H.
• 通讯作者: Jono H.

家族性アルツハイマー病治療薬としての糖修飾デンドリマー/shRNA複合体の有用性評価

糖修饰树枝状聚合物/shRNA复合物作为家族性阿尔茨海默病治疗剂的有效性评估

• 发表时间: 2021
• 作者: 井上雅理

シクロデキストリン修飾デンドリマー/short hairpin RNA 発現ベクターポリプレックスのアミロイド阻害機構の解明

阐明环糊精修饰的树枝状聚合物/短发夹RNA表达载体聚合体的淀粉样蛋白抑制机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 井上雅理;城野博史;小野寺理沙子;東 大志;本山敬一
• 通讯作者: 本山敬一

Feasibility Study of shRNA Complex with Cyclic Oligosaccharide-modified Dendrimer as a Drug for Brain Amyloidosis

环寡糖修饰树枝状大分子 shRNA 复合物作为脑淀粉样变药物的可行性研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 井上雅理

Feasibility Study of shRNA Polyplex as a Multi-functional Drug for Alzheimer’s Disease

shRNA Polyplex 作为阿尔茨海默病多功能药物的可行性研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Masamichi Inoue