B細胞遺伝子発現に基づく病原性形質芽細胞を標的としたSLEの新規治療法の開発

基于 B 细胞基因表达，开发针对致病性浆母细胞的 SLE 新型治疗方法

• 批准号: 21K08452
• 负责人: 藤井 博司
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08452/
• 关键词: 全身性エリテマトーデス; 形質芽細胞; B細胞; 抗DNA抗体

本研究の目的は、末梢血形質芽細胞におけるSLE患者と健常人間での発現変動遺伝子（in vivoマイクロアレイ)とBCRのみの刺激とBCR＋TLR9の共刺激間での発現変動遺伝子(in vitroマイクロアレイ)の比較に基づき、共通に上昇している遺伝子抽出し、それらの分子を特異的に標的する方法を開発（薬剤の探索）し、最終的にSLE形質細胞を特異的に標的とする治療法の開発につなげる。初年度の研究では、通常のB細胞刺激である抗BCR抗体＋CD40Lと病的B細胞（自己反応性B細胞）刺激を想定した抗BCR抗体＋CpG（TLR9のリガンド）あるいは抗BCR抗体＋R848 (TLR7/8のリガンド)の遺伝子発現をRT-PCRで定量し、in vivoマイクロアレイと比較した。当初は抗BCR抗体＋CpG＋IFNαによる刺激がもっともin vivoでのSLE形質細胞に特異的な遺伝子変化を反映すると考えていたが、CDC7、MEF2BなどのSLE形質細胞において特異的に上昇している遺伝子は抗BCR抗体＋R848＋IFNαによる刺激において特異的に上昇していた。また、CDC7阻害薬TAK-931が抗BCR抗体＋R848＋IFNαにより誘導される細胞分裂を著明に抑制したことを示した。R848, CpGを用いた形質芽細胞へ分化誘導する系（病原性B細胞の活性化系にあたる）は報告されているものの、これらのTLRのリガンドを用いないで形質芽細胞に分化誘導する系の報告はない。病原性B細胞の特徴的な遺伝子発現を検討するためには、非病原性B細胞の誘導系を樹立する必要がある。今年度はin vitroにおける病原性B細胞、非病原性B細胞から形質芽細胞へ樹立する系の樹立を試みた。

这项研究的目的是比较表达可变基因（体内微阵列）和表达可变基因（体外微阵列（体外微阵列）仅刺激BCR与BCR + TLR9中BCR中的SLE和健康人的患者的外周血血浆中BCR + TLR9的刺激与BCR + TLR9的共刺激。我们将开发一种方法来提取通常升高并专门针对这些分子的基因（药物搜索），并最终导致开发专门针对SLE浆细胞的疗法。在第一年的研究中，抗BCR抗体 + CD40L的基因表达是正常的B细胞刺激，抗BCR抗体 + CpG（TLR9的配体）或抗BCR抗体 + R848（TLR7/8的配体）通过RT-PCR量化了RT-PCR（刺激病态B细胞），并与刺激病态B细胞进行了量化。微阵列。最初，我们认为使用抗BCR抗体 + CpG +IFNα的刺激很可能反映了体内特有的基因变化，但是当用抗BCR抗体 + R848 +IFNα刺激时，特异性地升高了SLE血浆细胞（如CDC7和MEF2B）中特异性升高的基因。它还表明，抗BCR抗体 + R848 +IFNα诱导的细胞分裂明显抑制了CDC7抑制剂TAK-931。尽管有报道说，使用R848和CpG（对应于致病性B细胞的激活系统）的系统将分化为浆膜分化，但没有关于在不使用这些TLR的这些配体的情况下诱导分化为浆体的系统的报道。为了研究致病性B细胞的特征基因表达，有必要建立一个诱导非致病B细胞的系统。今年，我们试图建立一个可以在体外建立致病性B细胞和非致病B细胞的系统。