Identification of NASH patients who obtain therapeutic benefit from the improvement of nocturnal intermittent hypoxia and its application for clinical practice.

识别从改善夜间间歇性缺氧中获得治疗益处的 NASH 患者及其在临床实践中的应用。

• 批准号: 21K07401
• 负责人: 廣野 玄
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07401/
• 关键词: 非アルコール性脂肪肝炎; 非アルコール性脂肪性肝疾患; 睡眠時無呼吸; 間欠的低酸素血症; 持続陽圧呼吸療法; 睡眠時無呼吸症候群; 低酸素血症; NASH; 肝線維化; 脂肪肝

本研究の目的は、非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）を合併した閉塞性睡眠時無呼吸症（OSA）患者において、OSAに有効な持続陽圧呼吸療法（CPAP）による慢性間欠的低酸素血症（CIH）の改善がNAFLDから非アルコール性脂肪肝炎（NASH）への肝線維化進展の予防ないし治療法として提案できるか否かを検証することである。この研究では、CIHモデルマウスを用い、CIHによるNAFLDの肝線維化の進展機序を解明し、CIHの改善がNAFLD/NASHへ及ぼす影響を動物実験にて検証する。令和3年にマウス用CIH装置・チャンバーを購入し、その後、C57BL/6Jマウス8週齢オスを定期的に購入、飼育した。マウスはコントロール群（通常の飼料）とNASH群（高カロリー飼料）に分けてそれぞれ20週間飼育し、その後サクリファイスを行い、それぞれの血清、肝臓組織（病理組織およびRNA）を採取した。20週間飼育したNASH群のマウスの肝臓組織では、組織学的に著明な脂肪肝が確認された。令和4年度からは、20週間飼育したコントロール群とNASH群のマウスを、それぞれさらにCIHチャンバーに入れて飼育する群（CIH群）と、今までと同様に通常空気環境下で飼育する群（非CIH群）とに分けて追加で4週間飼育した。その後サクリファイスを行い、それぞれ血清、肝臓組織（病理組織およびRNA）を採取した。NASH+CIH群のマウスでは、肝臓組織は線維化を伴ったNASH像が確認された。血清から得られたデータについては現在統計学的に検討中である。さらに、血清を用いて今後ELISAによって肝線維化マーカーであるサイトケラチン18フラグメントを測定する予定である。また、それぞれの肝臓RNAをRT-PCRし、特にCIH群において低酸素誘導因子Hif-1（Hypoxia inducible factor-1）を確認中である。

本研究的目的是治疗阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）并发非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者，通过持续气道正压通气（CPAP）诱发慢性间歇性缺氧，达到有效治疗OSA的目的。本研究旨在验证是否可以提出改善CIH作为肝纤维化从NAFLD进展为非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的预防或治疗方法。本研究将利用CIH模型小鼠来阐明CIH引起的NAFLD肝纤维化进展的机制，并通过动物实验验证改善CIH对NAFLD/NASH的效果。 2021年，我们购买了小鼠CIH设备和腔室，此后，我们定期购买并饲养8周龄的雄性C57BL/6J小鼠。将小鼠分为对照组（正常饮食）和NASH组（高热量饮食），饲养20周后处死小鼠，收集各组血清和肝组织（病理组织和RNA）。保存20周的NASH组小鼠肝组织经组织学证实有明显的脂肪肝。从2020财年开始，饲养20周的对照组和NASH组的小鼠将被进一步安置在CIH室中（CIH组），以及一组像以前一样保持在正常空气环境中的动物（CIH组）。被分成非 CIH 组并再饲养 4 周。此后，处死并收集血清和肝组织（病理组织和RNA）。在NASH+CIH组的小鼠中，肝组织中证实有纤维化的NASH图像。目前正在对从血清中获得的数据进行统计研究。此外，我们计划使用血清通过 ELISA 测量细胞角蛋白 18 片段（肝纤维化标志物）。此外，我们目前正在通过每种肝脏RNA的RT-PCR来确认缺氧诱导因子Hif-1（Hypoxia inducible Factor-1），特别是在CIH组中。