強皮症モデルマウスにおけるHMGB1による骨髄由来間葉系幹細胞の誘導

HMGB1诱导硬皮病模型小鼠骨髓间充质干细胞

• 批准号: 21K06971
• 负责人: 植田 郁子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06971/
• 关键词: 強皮症モデルマウス; ブレオマイシン; single cell RNA sequence; 全身性強皮症; ブレオマイシン誘導強皮症モデルマウス; HMGB1; 間葉系幹細胞; 骨髄由来間葉系幹細胞; 強皮症モデルマウス; ブレオマイシン; single cell RNA sequence; 全身性強皮症; ブレオマイシン誘導強皮症モデルマウス; HMGB1; 間葉系幹細胞; 骨髄由来間葉系幹細胞

ブレオマイシン（BLM）誘発強皮症モデルマウスによるHMGB1ペプチドの効果について検証した。治療効果を確認するため、投与量、投与回数による評価を行った。1回100μgのBLMを週3回8週間投与し、後半の4週間HMGB1の治療をあわせて行う方法と、100μgのBLMを週3回4週間投与後中止し、その後4週間治療を行う方法、100μgのBLMを週5回2週間その後治療を2週間行う方法にて確認したが効果はみられなかった。予防効果を確認する実験として、100μgのBLMを週3回4週間投与、同時に治療を4週間行った群、1回50μg、10μgのBLMを週3回4週間投与、同時に治療を開始し8週間継続した群について検討したが予防効果はみられていない。皮膚の病理組織による測定以外に、ヒドロキシプロリンアッセイやqPCRでの評価もあわせて行なったが、治療群と非治療群間で有意差は認められていない。またBLM誘発性強皮症モデルマウスにおいて肺病変が誘発されることを確認し、肺病変をsingle cell RNA sequenceで違いを検討している。BLM誘発性強皮症モデルマウスの肺組織を回収しPDGFRα陽性細胞のサブクラスター解析を行った。Npnt+細胞とPi16+細胞が主要な細胞集団であった。PBS投与群と、ブレオマイシン投与群で、Npnt+細胞のDEG解析で有意に上昇したのが668、低下したものが580確認された。これらの遺伝子からGene ontologyを検討したところ、extracellular matrix organization、extracellular structure organization、collagen metabolic process、collagen fibril organizationなど線維化の機序に関わる遺伝子群の発現が亢進していることが確認できた。

检查了HMGB1肽在博来霉素（BLM）诱导的硬皮病模型小鼠中的影响。为了确认治疗的有效性，根据剂量和剂量数进行评估。我们确认了一种每周三次施用100μgBLM的方法，然后在下半年进行HMGB1治疗，在4周期间，每周3次给予100μgBLM，持续4周，并停用4周的治疗，持续4周，然后进行4周的治疗，一周均在2周中进行了2周的效果，随后进行了2周的效果，然后进行2周的效果，但随后效果为2周。在确认预防效果的实验中，我们检查了该组每周3次接受100μgBLM4周，同时治疗4周，并每周治疗50μg和10μgBLM3次，持续4周4周，并同时治疗4周，但未观察到预防效果。除了使用皮肤病理组织的测量值外，还进行了使用羟丙烯测定和QPCR的评估，但是治疗组和非治疗组之间没有观察到显着差异。我们还证实，在小鼠模型BLM诱导的硬皮病中诱导肺部病变，并使用单细胞RNA序列研究了肺部病变之间的差异。收集了来自BLM诱导的硬皮病模型小鼠的肺组织，并对PDGFRα阳性细胞进行了亚簇分析。 NPNT+细胞和PI16+细胞是主要的细胞群体。在经PBS处理的组和博来霉素治疗的组中，有668个显着增加，发现580个在NPNT+细胞的DEG分析中降低了580个。当我们检查了这些基因的基因本体时，我们证实了涉及纤维化机制的基因的基因表达，例如细胞外基质组织，细胞外结构组织，胶原代谢过程和胶原蛋白原纤维组织。