ヘムオキシゲナーゼを分子標的とした悪性黒色腫の浸潤転移抑制方法の確立

以血红素加氧酶为分子靶点抑制恶性黑色素瘤侵袭和转移方法的建立

• 批准号: 21K06907
• 负责人: 柴崎 晶彦
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06907/
• 关键词: NFE2L2; BACH1; HO-1; 細胞浸潤; NEF2L2; ヘムオキシゲナーゼ; 浸潤転移

悪性黒色腫（メラノーマ）の転移抑制および薬剤耐性は、治療上の大きな課題である。申請者はこれまでの研究により、一部のメラノーマが転写因子NFE2L2を高発現し、これらは高転移性であることを見出している。一方、近年、非小細胞肺がんにおいて、NEF2L2が誘導するヘムオキシゲナーゼ（HO-1）が、転写因子BACH1を安定化し転移を促進することが示されたが、本経路に対する特異的薬剤により転移が抑制できるか未だ検討されていない。そこで本研究は、NFE2L2経路の中間因子であるHO-1の活性または細胞内ヘム量を薬剤で制御することで、メラノーマの浸潤・転移できるかについて、培養細胞、実験動物レベルにおいて検討している。さらに、分子標的治療薬であるベムラフェニブに対して耐性を示すメラノーマの転移を上記方法により抑制できるか検討する予定である。以上より、メラノーマ治療の新たな分子標的を提示することを目的とする。本研究ではこれまでに、以下の点について明らかにした。①NFE2L2をiRNA法により減少することで、BACH1の変化につき、ウェスタン法により評価した。その結果、NFE2L2を高発現するメラノーマ細胞株では、NFE2L2の減少によりBACH1の顕著な減少が確認された。さらに、同様の条件で、マトリゲル法により細胞浸潤が有意に減少することを見出した。②HO-1の基質であるヘミンはBACH1の分解経路を促進することが知られている。そこで各種メラノーマ細胞株にヘミンを作用させ、マトリゲル法により浸潤能を解析した。　その結果、有意に細胞浸潤能が低下することを見出した。③ヘミンとNFE2L2経路中の因子の阻害剤を併用することで腫瘍細胞死が誘導できることも見出した。

恶性黑肿瘤（黑色素瘤）的转移和耐药性是治疗中的主要任务。申请人表示，到目前为止，一些研究表达了一些黑色素瘤NFE2L2，并且它们被高度转移。另一方面，近年来，已显示由NEF2L2诱导的血氧酶（HO-1）稳定了转录因子Bach1并促进转移。因此，这项研究正在研究培养细胞和实验性动物水平，是否可以通过控制HO-1的活性来渗透 /转移，这是NFE2L2途径的中间因素，或者是细胞内下摆的量。此外，我们计划考虑黑色素瘤的转移（表明对分子靶向药物Bemlafenib的耐药性）是否可以通过上述方法抑制。目的是提出黑色素瘤治疗的新分子靶标。在这项研究中，我们阐明了以下几点。 （1）通过通过IRNA方法降低NFE2L2，它是通过西方方法来评估Bach1的。结果，通过高表达NFE2L2的NFE2L2的降低证实了Bach1的降低。此外，在类似条件下，发现细胞浸润通过Matrigel方法显着降低。 （2）众所周知，Hemin是HO-1的底物，促进了Bach1的拆卸途径。因此，Hemin作用于各种黑色素切开术细胞，并通过Matrigel方法分析了浸润。结果，我们发现细胞浸润显着降低。 （3）还发现，可以通过使用HEMIN和NFE2L2抑制剂来指导肿瘤细胞死亡。

项目成果

DUSP4 Inactivation Leads to Reduced Extracellular Signal?Regulated Kinase Activity through Upregulation of DUSP6 in Melanoma Cells

DUSP4 失活导致细胞外信号减少？通过上调黑色素瘤细胞中 DUSP6 调节激酶活性

• DOI: 10.1016/j.jid.2022.02.007
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Investigative Dermatology
• 影响因子: 6.5
• 作者: Kamada Hirofumi;Yasuhira Shinji;Shibazaki Masahiko;Amano Hiroo;Maesawa Chihaya
• 通讯作者: Maesawa Chihaya