Absorption mechanism of nucleosides and their analogs in the gastrointestinal tract

核苷及其类似物在胃肠道的吸收机制

基本信息

批准号：
21K06678
负责人：
井上勝央
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度（2021年度）にオーファンモノカルボン酸トランスポーターであるSLC16A5/MCT6がCD147と複合体を形成し、安定に細胞膜に局在化することにより、ピリミジン核酸の前駆体であるオロト酸を輸送することを見出した。そこで本年度は、MCT6-CD147複合体の輸送機能を明らかにすることを目的に以下の検討を行った。・MCT6-CD147一過性発現系細胞におけるオロト酸輸送に対する各種阻害剤の影響を検討した結果、MCT6の輸送は、アデノシンやチミンによる有意な阻害は認められなかった一方、有機アニオントランスポーターであるOATsやOATPsの基質や阻害剤などで顕著に阻害された。・オロト酸を輸送することに加え、有機アニオントランスポーターとの基質認識性の類似性が確認されたことから、各種有機アニオン性蛍光基質を用いて基質探索を行った結果、5-carboxyfluorescein（5-CF）がMCT6の良好な基質となることが示された。・MCT6介在性の5-CF輸送は、細胞外のClイオンの存在下において顕著に阻害されることが示された。さらに、そのClイオンの非存在下における輸送活性は、細胞外のpHの低下とともに増加したが、プロトノフォアであるFCCPの添加による輸送活性の低下は認められなかった。以上の結果より、MCT6はClイオン感受性有機アニオントランスポーターであることが示され、その生理的役割は有機アニオンの分子形を基質として、Clイオン濃度の低い細胞質側で基質を認識し、細胞質から細胞外へ物質の排出輸送に関与することが示唆された。

去年（2021年），我发现孤儿单羧酸转运蛋白SLC16A5/MCT6与CD147形成复合物并稳定定位于细胞膜，从而转运乳清酸，这是嘧啶核酸的前体。因此，今年，我们进行了以下研究，旨在阐明MCT6-CD147复合物的转运功能。・检查各种抑制剂对MCT6-CD147瞬时表达细胞中乳清酸转运的影响，结果发现腺苷或胸腺嘧啶并未显着抑制MCT6转运，但发现MCT6转运是有机阴离子转运蛋白。被 OAT 和 OATP 底物和抑制剂抑制。・除了输送乳清酸之外，还确认了与有机阴离子转运蛋白的底物识别相似性。使用各种有机阴离子荧光底物进行底物搜索的结果显示，5-羧基荧光素（5-CF）是MCT6的良好底物。・在细胞外 Cl 离子存在的情况下，MCT6 介导的 5-CF 转运被显着抑制。此外，在没有 Cl 离子的情况下，转运活性随着细胞外 pH 值的降低而增加，但在添加质子载体 FCCP 后，没有观察到转运活性的降低。上述结果表明MCT6是一种Cl离子敏感的有机阴离子转运蛋白，其生理作用是以有机阴离子的分子形式为底物，识别Cl离子浓度较低的细胞质中的底物，并将其从细胞质中转运出来。有人认为它参与了物质向细胞外的排泄和运输。

项目成果

期刊论文数量（16）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Functional identification of SLC46A3 and its implication in the efficacy of trastuzumab emtansine

SLC46A3的功能鉴定及其对曲妥珠单抗emtansine疗效的影响

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ryuto Tomabechi;Hisanao Kishimoto;Taeka Sato;Naoki Saito;Keisuke Kiyomiya;Tappei Takada;Kei Higuchi;Yoshiyuki Shirasaka;Katsuhisa Inoue
通讯作者：
Katsuhisa Inoue

オーファントランスポーターSLC46A3の機能同定

孤儿转运蛋白SLC46A3的功能鉴定