定量の正確性を担保したターゲットリピドミクス解析法の開発とその臨床的応用

保证定量准确性的靶向脂质组学分析方法的开发及其临床应用

• 批准号: 21K06507
• 负责人: 巴山 忠
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06507/
• 关键词: ジアシルグリセロール; 液体クロマトグラフィー／質量分析計; フルオラスケミストリー; リン脂質; マトリックス効果; ターゲットリピドミクス; 質量分析; リピドミクス; 選択的抽出

本研究では，「フルオラスケミストリー」の概念を取り入れた選択的リン脂質抽出法の開発を目的としている。本抽出法を用いることで、例えば血液試料からリン脂質のみを除去することでき、分析対象であるジアシルグリセロール類を、リン脂質によるマトリックス効果を受けることなく、正確にLC-MS装置にて測定できることが可能となる。前年度までに、フルオラス抽出法の基礎的検討を行い、フルオラス溶媒であるパーフルオロアルカン類ならびにリン脂質抽出のための媒体として利用するパーフルオロポリエーテルカルボン酸の選定、ならびに用いる金属類のスクリーニングを行った。さらに市販血液試料を用い、本法のリン脂質除去能ならびにマトリックス効果改善に対する有用性を評価した。これらの結果を踏まえて本年度は、本法の有用性をさらに検証すべく、先ずは内因性ジアシルグリセロールの影響を避ける目的で、安定同位体標識化アシルグリセロールを用いた検証を詳細に行った。試料としては、市販のヒト血清及び血漿への添加サンプルを用いた。真度や再現性、さらにマトリックス効果などを含めた詳細なバリデーションを実施した結果、いずれも満足のいく結果を得ることができた。さらに、健常人より採取した血液試料を用いた検証も行った。本法により抽出の前後での定量結果を確認したところ、抽出前では明らかにマトリックス効果による測定の妨害（ピーク強度の減少や再現性の低下など）を受けていること見られたが、本抽出法を採用することで、それら妨害を受けることなく、内因性ジアシルグリセロールの測定が可能であり、定量の正確性や再現性が大幅に改善できることを示すことができた。

这项研究旨在开发一种选择性的磷脂提取方法，该方法结合了“全俄尔斯语训练”的概念。通过使用这种提取方法，例如，只能从血液样本中除去磷脂，并且可以用LC-MS设备准确测量而没有磷脂的基质效应。到上一年，进行了完整的ORAS提取方法的基本考试，完善的Oloroalkans是完整的牛剂，以及选择用于提取磷脂的培养基的佩里尔多酯羧酸的选择，并筛选了使用的金属所用的金属去了。此外，使用商业血液样本，评估了这种去除磷脂和改善基质效应的方法。基于这些结果，今年为了进一步验证该定律的有用性，我们首先使用稳定的孤立稳定的鸟根酸酯进行了验证，以避免内源性Dizzylgricerol的影响。作为样品，使用了用于市售的人血清和血浆的添加样品。由于进行详细验证，包括严重性，可重复性和矩阵效应，我们能够获得令人满意的结果。此外，使用从健康人员那里收集的血液样本进行了验证。当该法律确认提取前后的定量结果时，清楚地看到，在提取之前，通过矩阵效应测量测量（例如峰值强度的降低或可重复性的降低），但是这是通过采用法律来提取的，可以测量内源性的dizzylgricololol，而无需任何阻塞，并显着提高定量准确性和可重复性。

项目成果

フルオラス誘導体化-LC-MS 法を用いた食品中カゼインの選択的分析

氟衍生-LC-MS法选择性分析食品中的酪蛋白

• 发表时间: 2021
• 作者: 中武 樹;坂口洋平，古賀鈴依子，吉田秀幸，能田 均;能田 均;川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，巴山 忠，吉田秀幸，能田 均
• 通讯作者: 川末慎葉，坂口洋平，古賀鈴依子，巴山 忠，吉田秀幸，能田 均

Liquid Chromatographic Determination of <i>o</i>-Phosphoethanolamine in Human Plasma Using Fluorescent Derivatization

荧光衍生化液相色谱法测定人血浆中的<i>o</i>-磷酸乙醇胺

• DOI: 10.1248/cpb.c22-00453
• 发表时间: 2023
• 期刊: Chemical and Pharmaceutical Bulletin
• 影响因子: 1.7
• 作者: Ryoko Tomita;Tadashi Hayama;Nao Nishijo;Rintaro Sogawa;Chisato Shimanoe;Toshihiro Fujioka
• 通讯作者: Toshihiro Fujioka

フルオラス誘導体化LC-MS/MS法を用いた生体試料中シアル酸関連化合物の選択的分析

使用氟衍生化 LC-MS/MS 方法选择性分析生物样品中的唾液酸相关化合物

• 发表时间: 2021
• 作者: 坂口洋平;川末慎葉，古賀鈴依子，巴山 忠，吉田秀幸，能田 均
• 通讯作者: 川末慎葉，古賀鈴依子，巴山 忠，吉田秀幸，能田 均

イオン化及びフラグメンテーション効率の改善を指向した誘導体化法によるペプチド類の高感度LC-MS/MS分析

使用衍生化方法对肽进行高灵敏度 LC-MS/MS 分析，旨在提高电离和裂解效率

• 发表时间: 2022
• 作者: 山田 実佳;巴山 忠;西條 尚;冨田 陵子;藤岡 稔大
• 通讯作者: 藤岡 稔大

Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for the quantification of O-Phosphoethanolamine in human plasma

开发用于定量人血浆中 O-磷酸乙醇胺的酶联免疫吸附测定法

• DOI: 10.1016/j.ab.2022.114952
• 发表时间: 2022
• 期刊: Analytical Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: Tetsuya Saita;Hiroto Kataoka;Rintaro Sogawa;Tadashi Hayama;Ryoko Tomita;Akira Monji;Yoshito Mizoguchi;Chisato Shimanoe
• 通讯作者: Chisato Shimanoe