疾患iPS細胞を用いた多発性硬化症に対するドネペジルの有効性と作用機序の解明

使用患病 iPS 细胞阐明多奈哌齐治疗多发性硬化症的有效性和作用机制

基本信息

批准号：
21K06432
负责人：
今村宰
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Defense Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06432/
关键词：
ドネペジル iPS細胞脱髄疾患多発性硬化症

项目摘要

我々はアルツハイマー型認知症治療薬ドネペジル(DNP)の新たな薬効としてヒトiPS細胞由来オリゴデンドロサイト前駆細胞からオリゴデンドロサイトへの分化誘導作用を見出した。本研究では、多発性硬化症患者のiPS細胞(MS-iPSC)から分化誘導したオリゴデンドロサイト系譜細胞を用いて細胞病態を解明し、さらにこの病態モデルに対するDNPの有効性と作用機序を明らかにすることを目的としている。本年度は、既存培養法を改良することでMS-iPSCからオリゴデンドロサイト前駆細胞(OPC)へと分化誘導を行い、細胞表現型解析を進めた。初期OPCマーカーとして知られているOlig2およびNkx2.2の発現を免疫染色により確認したところ、MS-iPSCでは健常群に比べて二重陽性細胞数の減少が認められた。また、oligosphere形成能を調べた結果、健常群と比較してMS-iPSC由来分化細胞から形成されたoligosphereの数およびサイズともに低下していることが明らかとなった。これらの傾向は一次oligosphereをシングルセルに分散して形成された二次oligosphereにおいても同様に見られたことから、MS-iPSC由来OPCでは増殖能や自己複製能に異常がある可能性が示唆された。細胞増殖に関与するシグナル伝達分子を解析したところ、MS-iPSC由来oligosphereにおいてextracellular regulated kinase (ERK) の活性化が抑制されていることがわかった。一方、アポトーシスについてはMS-iPSC由来oligosphereと健常群とで差は認められなかった。現在、他のMS-iPSC株においても同様の細胞表現型を示すか検証中である。

我们发现了阿尔茨海默氏症的痴呆症多奈替齐（DNP）一种新的药物作用，从人IPS衍生的寡头前体前体细胞到寡聚地点的分化引导效应。在这项研究中，在多发性硬化症患者中诱导与IPS细胞（MS-IPSC）区分的少突多部位谱系细胞阐明了该病理模型的DNP的有效性和机制。在这个财政年度，通过改进现有的培养方法，从MS-IPSC到少突endro位点前体细胞（OPC）提供了分化，并促进了细胞表达型分析。当通过免疫测定法确认Olig2和NKX2.2的表达（称为初始OPC标记）时，与卫生组相比，MS-IPSC被发现减少了双阳性细胞的数量。在检查寡聚的形成时，很明显，与健康组相比，由MS-IPSC衍生的细胞形成的寡聚的数量和大小已经减少。这些趋势也在二寡聚层中看到，这是通过将主要寡聚层分配到单个细胞中形成的，这表明MS-IPSC衍生的OPC可能具有异常的生长和自我塑料能力。对细胞增殖涉及的信号分子的分析表明，在MS-IPSC衍生的寡聚中抑制了细胞外调节激酶（ERK）的激活。另一方面，对于MS-IPSC衍生的寡聚和健康组，凋亡尚未被识别。目前，还验证了其他MS-IPSC共享是否显示相似的细胞表达类型。