滑膜マクロファージに着目した関節リウマチ病態の性差メカニズムの解明

以滑膜巨噬细胞为中心阐明类风湿性关节炎病理学的性别差异机制

基本信息

批准号：
21K05974
负责人：
佐伯法学
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、関節リウマチ病態に生じる性差をマクロファージのERαシグナルに着目して解析を進めている。昨年度、myeloid cell特異的ERα欠損マウス (cKO, LysMCre; ERαflox/flox )を作出し、マクロファージに発現するERαは女性ホルモン依存的に関節炎病態を増悪することを示したが、本年度はその詳細を以下の如く明らかにした。Flow cytometory解析で、Control (ERaflox/floxおよびLysMCre; ERαflox/+)とcKOの末梢血単球の割合に変化が認められなかったため、ControlとcKOのパラバイオーシスを作出し両マウスに関節炎を誘導したところ、cKOで関節炎病態の抑制が認められた。このことから、滑膜マクロファージのERαシグナルが関節炎病態に寄与することが示唆された。また、scRNA-seq解析により、関節炎誘導後3日目の滑膜組織では、滑膜マクロファージクラスターの割合がcKOと比較してControlで減少した。さらに、ControlとcKOの滑膜マクロファージクラスター間で発現変動していた遺伝子のGO解析により、免疫反応関連や細胞内代謝関連の遺伝子がcKOで有意に減少していることが明らかとなった。そこで、ERαシグナルがマクロファージの代謝機能に及ぼす影響を明らかするため、M1及びM2に分極化した骨髄由来マクロファージの細胞内代謝をFlux analyzerで解析した。その結果、Control由来細胞と比較してcKO由来細胞で、M1で細胞外酸化速度が減少し、M2で酸素消費速度が減少した。以上より、マクロファージに発現するERαシグナルはリガンド依存的に細胞内代謝を介した免疫応答を活性化および滑膜マクロファージの減少を誘導し、関節炎病態増悪に寄与することが示唆された。

我们目前正在通过关注巨噬细胞的 ERα 信号来分析类风湿关节炎病理学中的性别差异。去年，我们培育了骨髓细胞特异性 ERα 缺陷小鼠（cKO、LysMCre；ERαflox/flox），结果表明，巨噬细胞中表达的 ERα 以雌性激素依赖性方式加剧关节炎病理。流式细胞术分析显示对照（ERaflox/flox 和 LysMCre；ERαflox/+）和 cKO 中的外周血单核细胞百分比没有变化，因此我们在对照和 cKO 中创建了联体共生，并在两只小鼠中诱导了关节炎。关节炎病理学。这表明来自滑膜巨噬细胞的 ERα 信号有助于关节炎的病理学。此外，scRNA-seq分析显示，在关节炎诱导后3天的滑膜组织中，与cKO相比，对照中滑膜巨噬细胞簇的比例降低。此外，对对照和cKO滑膜巨噬细胞簇之间表达变化的基因进行GO分析表明，与免疫反应和细胞内代谢相关的基因在cKO中显着减少。因此，为了阐明ERα信号对巨噬细胞代谢功能的影响，我们使用通量分析仪分析了M1和M2极化骨髓源性巨噬细胞的细胞内代谢。结果，与对照来源的细胞相比，cKO来源的细胞中M1的细胞外氧化速率降低，M2的耗氧速率降低。上述结果表明，巨噬细胞中表达的ERα信号以配体依赖性方式通过细胞内代谢激活免疫反应，并诱导滑膜巨噬细胞减少，导致关节炎病理加重。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

関節炎モデルマウスにおけるマクロファージの ERα 機能解析

关节炎模型小鼠巨噬细胞ERα功能分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
佐伯法学;今井祐記
通讯作者：
今井祐記

滑膜線維芽細胞に発現するUHRF1はDNAメチル化を介して関節リウマチの多様な増悪因子を抑制する

滑膜成纤维细胞中表达的UHRF1通过DNA甲基化抑制类风湿关节炎的各种加重因素

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
佐伯法学;井上和樹;大塚まき;渡森一光;水木伸一;竹中克斗;五十嵐勝秀;三浦裕正;今井祐記
通讯作者：
今井祐記

Estrogen receptor-alpha promotes activation of synovium-resident macrophages in arthritis model mice.

雌激素受体-α 促进关节炎模型小鼠滑膜驻留巨噬细胞的激活。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
佐伯法学;今井祐記
通讯作者：
今井祐記

Stabilization of UHRF1 in synovial fibroblasts is a novel therapeutic strategy for rheumatoid arthritis.

滑膜成纤维细胞中 UHRF1 的稳定是类风湿关节炎的一种新的治疗策略。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Noritaka Saeki;Kazuki Inoue;Maky Ideta-Otsuka;Kunihiko Watamori;Shinichi Mizuki;Katsuto Takenaka;Katsuhide Igarashi;Hiromasa Miura;Yuuki Imai
通讯作者：
Yuuki Imai

Isolation and Culture of Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts from Murine Arthritis Tissue

小鼠关节炎组织中原代滑膜巨噬细胞和成纤维细胞的分离和培养