Construction of high resolution separation analysis and function control methods for natural supramolecules

天然超分子高分辨率分离分析与功能控制方法的构建

基本信息

批准号：
21K05128
负责人：
島崎洋次
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は以下の3件の論文を公表することができた。特に１と３の業績はテーマである天然酵素の超分子分析に深く関わりのあるものである。マウス肝臓などの生体試料中の超分子を非変性条件の２次元電気泳動法により分離し、それらを電気泳動によりさらに溶液状態で抽出し、超分子の構成成分や物性を調べることができた。特に、カルボキシルエステラーゼとトランスフェリンからなる超分子のエステラーゼ活性はFe2+により阻害されるが、トランスフェリンによりFe2+が捕獲されることにより、阻害が解除されることがわかった。これは超分子の生理的な役割を考察していくうえで重要な知見と考えらえる。1）島﨑洋次、中尾香琳、福家麗. 非変性2次元電気泳動法によって分離、検出されたカルボキシルエステラーゼとトランスフェリン複合体の電気泳動的抽出. 電気泳動 (in press).2）Kenichiro Nagata, Ryo Ashikaga, Wakako Mori, Tamotsu Zako, Youji Shimazaki. Analysis of the enzymatic degradation of lysozyme fibrils using a non-denaturing gel electrophoresis and double staining with coomassie brilliant blue G-250 and R-250 dyes. Analytical Sciences 2023;39: 267-274.3）Karin Nakao, Youji Shimazaki. Electrophoretic extraction of protein complexes after separation and detection by a combined methods of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reversible staining. Journal of Electrophoresis 2022;66: 5-11.

去年，我们能够发表以下三篇论文：尤其是成就1和3与自然酶超分子分析的主题深深相关。在非换性条件下，通过二维电泳将生物样品（例如小鼠肝脏）的超分子分离，然后通过电泳在溶液中进一步提取，从而可以研究其成分和物理特性的超分子。特别是，发现由Fe2+抑制由羧酸酯酶和转铁蛋白组成的超分子的酯酶活性，但通过捕获FE2+，转铁蛋白抑制了抑制作用。在考虑超分子的生理作用时，这被认为是一个重要发现。 1）Shimazaki Yoji，Nakao Karin，Fukuya Rei。通过非降解2D电泳分离和检测的羧酸酯酶和转铁蛋白复合物的电泳提取。电泳（在印刷中）.2）Kenichiro Nagata，Ryo Ashikaga，Wakako Mori，Tamotsu Zako，Youji Shimazaki。使用非粘性凝胶电泳对溶菌酶原纤维的酶促降解分析，并用COOMASSIE亮蓝色G-250和R-250染料进行双重染色。分析科学2023; 39：267-274.3）Youji Shimazaki Karin Nakao。分离和检测蛋白质复合物的电泳提取，通过一种非构成二维电泳和可逆染色的合并方法。电泳杂志2022; 66：5-11。