Molekulare und funktionelle Charakterisierung von Stamm- und Progenitorzellen der menschlichen Hornhaut

人角膜干细胞和祖细胞的分子和功能表征

• 批准号: 240204035
• 负责人: Professor Dr. Hannes Klump, Ph.D.
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Augenheilkunde
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2012-12-31 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/240204035?language=en
• 关键词: Molekulare; und; funktionelle; Charakterisierung; von

Bei vielen Erkrankungen der Augenoberfläche stellt die Stammzellinsuffizienz, die aus dem Verlust der epithelialen Stammzellpopulation der Hornhaut resultiert, ein charakteristisches Merkmal dar. In diesem Fall ist eine chirurgische Erneuerung der Stammzellpopulation durch Transplantation von humanen, im Rahmen eines Tissue-Engineering auf Amnionmembran (AM) expandierten, limbalen Stamm- und Progenitorzellen (LSPZ) auf die Hornhautoberfläche erforderlich. Eine Methode zur Züchtung von LSPZ auf AM wird in der Universitäts-Augenklinik Essen angewandt. Aus wenigen LSPZ, gewonnen aus einer autologen Limbusbiopsie, wird ein transplantationsfähiges Epithel erzeugt. Das Kultursystem ist frei von nicht humanen Substanzen und Zellen. Die Transplantation dieses Limbusepithels führt aber nur in rund 77% der behandelten Fälle zur Stabilisierung der Hornhautoberfläche. Es bleibt unklar, warum in ca. 23% der Fälle ein Transplantatversagen auftritt. Eine Erklärung ist die bisher fehlende aussagekräftige Qualitätsmessung des in vitro generierten Grafts und ein unvollständiges Verständnis der Interaktion der LSPZs mit ihrer Nische, die bei der Zellkultur durch die verwendete AM simuliert wird. Die Qualität der Zellkulturen sollte primär über den dauerhaften Erhalt der LSPZs in vitro definiert werden. Da bis heute ein eindeutiger Biomarker für LSPZs fehlt, wird zu deren Charakterisierung eine Kombination verschiedener Eigenschaften herangezogen. Das hier vorgestellte Projektvorhaben soll sowohl das Verständnis der Stammzellcharakteristika der LSPZs erweitern, als auch den Einfluss der Nische untersuchen. Ziel ist es die Qualität der Zellkultur zu verbessern. Subpopulationen von LSPZs sollen mittels Durchflusszytometrie aus limbalen Zellkulturen isoliert und funktionell charakterisiert werden. Anschließende Microarrayanalysen der so angereicherten Zellen sollen helfen Kandidatengene für limbale “Stemness“ zu finden. Deren Relevanz soll dann mittels ektoper Expression und funktioneller Analyse validiert werden. Durch die Verwendung von unterschiedlich aufbereiteter AM bei der Kultivierung der Zellen, sowohl intaktem als auch deepithelisiertem Gewebe, soll der Einfluss von Faktoren des amniotischen Epithels auf die Ausbildung der Charakteristika der LSPZ untersucht werden.

Bei Vielen Erkrankungen derAugenoberflächestellt die Stammzellinsuffizienz，Die Aus dem dem dem verlust der epithelialen stammzellpopulation der hornhaut resultiert，ein charakteristisisches merkmal dar。 In diesem Fall ist eine chirurgische Erneuerung der Stammzellpopulation durch Transplantation von humanen, im Rahmen eines Tissue-Engineering auf Amnionmembran (AM) expandierten, limbalen Stamm- und Progenitorzellen (LSPZ) auf die Hornhautoberfläche erforderlich. Eine Methode ZurZüchtungvon lspz auf am wird in derUniversitäts-Augenklinik Essen Angewandt。 Aus Wenigen LSPZ，Gewonnen Aus Einer Autologen Limbusbiopsie，Wird EinTransplantationsfähigesFähigesEpithel Erzeugt。 Das Kultursystem IST Frei von Nicht人类替代和Zellen。死亡移植在Rund 77％derbehandeltenfälleZur中死亡Limbusepithelsführtaber nur，这是23％的时间，合格师是唯一在体外死亡的人，而另一种是可互换的lspzs在LSPZ中可互换的可互换状态，这些嫁接是可互换的。 PrimärüberDendauerhaften erhalt der lspzs在体外defariert werden。 da bis heute eine eindeutiger生物标志物fürlspzs fehlt，wird zu deren charakterisierung eine kombination verschiedener eigenschaften eigenschaften herangezogen。 Das Hier vorgestellte projektvorhaben soll sowohl dasverständnisder stammzellchelakteristika der lspzs erweitern，als auch auch auch den einfluss der einfluss der nische untersuchen。 Ziel Ist ey subpropution是世界的一部分。亚种群是自今年年底以来已经过去的世界一部分。 MicroArrayanalysen der求解了可解决的Zellen solren自拍照，而KandidategengenfürLimbale“ stemness” Zu Zu发现。相关的solren手套ektoper表达和funktioneller分析了valyiert werden。 Durch die Verwendung von The aufbereiteter AM bei der Kultivierung der Zellen, sowohl intaktem als auch deepthelisiertem gewebe, soll der Einfluss von Faktoren des amniotischen Epithels auf die Ausbildung der Charakteristika der LSPZ untersucht werden.