Strukturbestimmung von Proteorhodopsin mittels NMR Spektroskopie

使用核磁共振波谱法测定蛋白视紫红质的结构

基本信息

项目摘要

Membranproteine stellen derzeit eine der großen Herausforderungen der Strukturbiologie dar. Ihre Strukturbestimmung wird zum einen dadurch erschwert, dass viele Membranproteine sich nur sehr schlecht in zellulären Systemen exprimieren lassen und zum anderen dadurch, dass sowohl diffraktierende Kristalle als auch gut aufgelöste NMR Spektren nur schwer zu erhalten sind. In den letzten Jahren haben wir gezeigt, dass wenigstens das Expressionsproblem durch die Verwendung eines zellfreien Expressionssystems in sehr vielen Fällen gelöst werden kann. Basierend auf diesem zellfreien Expressionssystem haben wir Methoden entwickelt, mit denen NMR-aktive Isotope in bestimmten Mustern eingeführt werden können, die die Resonanzzuordung in NMR Experimenten erheblich erleichtern. Dadurch ist es uns möglich, auch größere Membranproteine strukturell zu untersuchen. In dem vorliegenden Antrag beschreiben wir die geplante Strukturuntersuchung von Proteorhodopsin mittels Flüssig-NMR Spektroskopie. NMR-Spektren des Proteorhodopsin zeigen eine hervorragende Dispersion der chemischen Verschiebungen. Um Informationen über die Seitenketten zu erhalten, werden wir das Protein mit SAIL Aminosäuren markieren, die es erlauben, auch große Proteine mittels NMR zu untersuchen. Diese Strukturuntersuchungen werden die Basis für eine detaillierte Untersuchung der Konformationen angeregter Zustände liefern.
膜普罗蛋白Stellen derzeit eine der dergroßenherausforderungender strukturkiologie dar。 Ihre Strukturbestimmung wird zum einen dadurch erschwert, dass viele Membranproteine ​​sich nur sehr schlecht in zellulären Systemen exprimieren lassen und zum anderen dadurch, dass sowohl diffraktierende Kristalle als auch gut aufgelöste NMR Spektren nur schwer zu Erhalten Sind。在Den Letzten Jahren Haben WIR中,美国表达系统可能会发生变化。美国的表达系统可能会发生变化,而NMR不可能的同位素是实现这一目标的最佳方法,而NMR体验是实现这一目标的最佳方法。蛋白质的蛋白质和蛋白质的蛋白质。该蛋白质是一种不是问题的蛋白质。该蛋白质是一种不是问题的蛋白质。该蛋白质是一种不是问题的蛋白质。该蛋白质是一种不是问题的蛋白质。该蛋白质是一种不是问题的蛋白质。蛋白质是一种不是问题的蛋白质,蛋白质是一种不是问题的蛋白质。 NMR蛋白质be是无法使用的。两国与其他各方之间的平衡是没有算法的。

项目成果

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Characterization of the ground state dynamics of proteorhodopsin by NMR and optical spectroscopies
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  • DOI:
    10.1007/s10858-012-9684-8
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.7
  • 作者:
    Stehle;F. Scholz;F. Löhr;S. Reckel;C. Roos;M. Blum;M. Braun;C. Glaubitz;V. Dötsch;J. Wachtveitl;H. Schwalbe
  • 通讯作者:
    H. Schwalbe
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