Strukturbestimmung von Proteorhodopsin mittels NMR Spektroskopie

使用核磁共振波谱法测定蛋白视紫红质的结构

• 批准号: 177627320
• 负责人: Professor Dr. Volker Dötsch
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biophysikalische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2009-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/177627320?language=en
• 关键词: Strukturbestimmung; von; Proteorhodopsin; mittels; NMR

Membranproteine stellen derzeit eine der großen Herausforderungen der Strukturbiologie dar. Ihre Strukturbestimmung wird zum einen dadurch erschwert, dass viele Membranproteine sich nur sehr schlecht in zellulären Systemen exprimieren lassen und zum anderen dadurch, dass sowohl diffraktierende Kristalle als auch gut aufgelöste NMR Spektren nur schwer zu erhalten sind. In den letzten Jahren haben wir gezeigt, dass wenigstens das Expressionsproblem durch die Verwendung eines zellfreien Expressionssystems in sehr vielen Fällen gelöst werden kann. Basierend auf diesem zellfreien Expressionssystem haben wir Methoden entwickelt, mit denen NMR-aktive Isotope in bestimmten Mustern eingeführt werden können, die die Resonanzzuordung in NMR Experimenten erheblich erleichtern. Dadurch ist es uns möglich, auch größere Membranproteine strukturell zu untersuchen. In dem vorliegenden Antrag beschreiben wir die geplante Strukturuntersuchung von Proteorhodopsin mittels Flüssig-NMR Spektroskopie. NMR-Spektren des Proteorhodopsin zeigen eine hervorragende Dispersion der chemischen Verschiebungen. Um Informationen über die Seitenketten zu erhalten, werden wir das Protein mit SAIL Aminosäuren markieren, die es erlauben, auch große Proteine mittels NMR zu untersuchen. Diese Strukturuntersuchungen werden die Basis für eine detaillierte Untersuchung der Konformationen angeregter Zustände liefern.

膜蛋白是结构涡轮生物学的重要组成部分。在过去的几年中，我们发现表达系统中的表达问题是最常见的。 Basierend auf diesem zellfreien Expressionssystem haben wir Methoden entwickelt, mit denen NMR-active Isotope in bestimmten Mustern eingeführt werden können, die die die Resonanzzuordung in NMR Experimenten erheblich erleichtern. zu untersuchen。 Strukturuntersuchungen werden。

项目成果

Requirements on paramagnetic relaxation enhancement data for membrane protein structure determination by NMR.

NMR 测定膜蛋白结构的顺磁弛豫增强数据要求。

• DOI: 10.1016/j.str.2012.03.010
• 发表时间: 2012-06-06
• 期刊: Structure
• 影响因子: 5.7
• 作者: Daniel Gottstein;S. Reckel;V. Dötsch;P. Güntert
• 通讯作者: P. Güntert