Prozesstechnische Untersuchungen zum Einsatz von Enzymen bei der Aufarbeitung biotechnologischer Produkte (Downstream Processing). Entwicklung eines Verfahrens zur Beseitigung von Endotoxinen unter Verwendung von Biokatalysatoren

在生物技术产品加工（下游加工）中使用酶的工艺工程研究。

• 批准号: 13759183
• 负责人: Professor Dr. Markus Pietzsch
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Aufarbeitung biotechnischer Produkte
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/13759183?language=en
• 关键词: Prozesstechnische; Untersuchungen; zum; Einsatz; von

Lipopolysaccharide (LPS, Endotoxine) sind Bestandteile der äußeren Membran gram-negativer Bakterien (z. B. Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Vibrio cholerae) und lösen im Menschen im ng/kg(Körpergewicht)-Maßstab Immunreaktionen von Fieber bis hin zum septischen Schock aus. Diese Moleküle bedecken ca. 75 % der Oberfläche und werden z. B. bei der Zellteilung in das Kulturmedium abgegeben. Bei der Reinigung intrazellulärer Produkte sorgt der Scherstress, der aufgewendet werden muss, um die Zellwände aufzubrechen, ebenfalls dafür, dass LPS in das Lösungsmittel (Aufschlusspuffer) freigesetzt werden. Bei der Herstellung von Therapeutika und Wirkstoffen müssen LPS deshalb im Verlaufe des Aufarbeitungsprozesses unbedingt beseitigt werden. Das übliche Verfahren beruht letztendlich auf der ¿Verdünnung der Ausgangslösung mit endotoxin-freiem Wasser (Water for injection, WFI) während der Downstream-Prozesse. Andere Verfahren sind bezüglich der Abtrennung von LPS aus proteinhaltigen Lösungen ineffektiv und haben keine technische Bedeutung erlangt. Obwohl es biochemische und medizinische Untersuchungen zur Beziehung zwischen Struktur und fiebererregender Wirkung von Endotoxinen gibt, in deren Zusammenhang auch Enzyme zur Herstellung von Teilstrukturen von LPS eingesetzt wurden, gibt es bisher erstaunlicherweise keine Ansätze, Biokatalysatoren in technischen Verfahren zur Abreicherung dieser Verunreinigungen einzusetzen. Ziel des Vorhabens ist es daher, geeignete Biokatalysatoren aufzufinden und für die vollständige Beseitigung von Endotoxinen nutzbar zu machen. Bevorzugt sollen solche Enzyme verwendet werden, die eine hohe Spezifität bezüglich der Verunreinigungen besitzen und das Zielprodukt unverändert lassen. Entsprechende Biokatalysatoren sollen identifiziert (Bestimmung der N-terminalen Sequenz), charakterisiert und immobilisiert werden.

Lipopolysaccharide (LPS, Endotoxine) Best-by-Teile Membran gram-negativer Bakterien (z. B. Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Vibrio cholerae) and Menschen immunreaked in ng/kg(Körpergewicht)-Maßstab Immunreaked in Fieber bis hinduzum septischen Schock Aus。 Oberfläche和Werden Z的75％的时间。 B. B. Bei Zellteilung在Das Kulturmedium abgeben中。北京是Scherstrasses以及永恒瀑布的场景背后的省级力量，以及LPS（Aufschlusspuffer）和新LPS的永恒跌倒。北京是Aufragment幕后的省级力量，永恒落在LP中。北京是Aufragment幕后的省级力量，也是LP的爆炸。北京是Aufragment幕后的省级力量，也是LP的爆炸。 LETZTENDLICH AUF DER„VERDünnungderausgangslösungMIT内毒素 - 毒素 - 毒素 - 剂量（注入水，wfi）währendder der der der der der der der der derstream-prozesse。 Andere verfahren sindbezüglichder abtrennung von lps aus proteinhaltigenlösungenineffektiv und haben keine keine technische bedeutung erlangt。 Obwohl es biochemische und medizinische Untersuchungen zur Beziehung zwischen Struktur und fiebererregender Wirkung von Endotoxinen gibt, in deren Zusammenhang auch Enzyme zur Herstellung von Teilstrukturen von LPS eingesetzt wurden, gibt es bisher EstaunlicherweiseKeineAnsätze，Technischen verfahren Zur Zur abreicherung Dieser Verunreinigungen Einzusetzen中的Biokatalysatoren。 Ziel des Vorhabens Ist es daher，Geeignete Biokatalysatoren Aufzufinden undfürdievollständigeBeseitigungvon von enerotoxinen nutzbar Zu Machen。 Bevorzugt Sollen Solche酶Verwendet Werden，Die Eine HoheSpezifitätbezüglichDerverunreinigungen besitzen und das ZielproduktunverändertLassen。 Entsprechende Biokatalysatoren Sollen识别（Bestimmung der N-terminalen Sequenz），Charakterisiert and Immobilisiert Werden。