大麻素WIN靶向PPARγ基因抗肝细胞癌增殖及其信号转导通路研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81141101
  • 项目类别：
    专项基金项目
  • 资助金额：
    10.0万
  • 负责人：
    赵青
  • 依托单位：
    广州医科大学
  • 学科分类：
    H1819.肿瘤生物治疗
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2012-12-31

项目摘要

国外和我们研究证实,结构清楚且无精神方面副作用的大麻素WIN（WIN55，212-2）可以激活肝癌细胞PPARγ（过氧化物酶体增殖物激活受体γ）、抑制其c-myc基因表达与增殖,诱导其凋亡，但其分子机制及体内抑瘤活性不明了。PPARγ位于细胞信号传导通路的交叉点，PPARγ的激活可以下调c-myc等的表达,抑制癌细胞hTERT的表达、端粒酶活性及细胞增殖。我们设想，WIN通过激活肝癌细胞PPARγ的表达而下调c-myc、抑制全长hTERT转录体的表达,从而抑制肝癌细胞端粒酶活性与增殖，诱导其凋亡。因此,本项目拟在我们前期工作基础上采用裸鼠肝癌模型研究WIN的体内抑瘤活性;使用拮抗剂、激动剂、siRNA、定量RT-PCR等方法研究PPARγ基因对细胞增殖与下游基因c-myc、hTERT表达的作用;最后进行端粒酶活性及 hTERT RNA变位剪接的研究，深入探讨大麻素WIN的抑瘤作用及分子机制

结项摘要

为了探讨大麻素WIN和THC激活大麻受体对肝癌细胞增殖和凋亡的作用，并对其机制进行初步探讨。该课题将肝癌细胞（HepG2和BEL-7402）分成对照组、不同剂量大麻受体激动剂处理组。MTT及细胞克隆形成等方法测定WIN和THC对肝癌细胞细胞增殖的影响；DNA梯度电泳法检测其细胞凋亡DNA片段，流式细胞术等检测分析各组细胞凋亡率变化，Western blot及定量RT-PCR等分析各组细胞caspase-3和c-myc以及PPAR-γ的蛋白表达等，分光光度法检测caspase-3、8、9的活性，凝胶迁移实验（EMSA）检测PPAR-γ的活性。结果是大麻受体激动剂WIN和THC能抑制肝癌细胞生长和c-myc的蛋白表达，诱导肝癌细胞凋亡，上述效应具有剂量依赖性。提示WIN和THC可能通过诱导细胞caspase-3 的蛋白表达和激活caspase-3、8、9活性进而诱导肝癌细胞凋亡，并与c-myc以及PPAR-γ的蛋白表达相关，PPAR-γ介导了大麻素诱导的肝癌细胞凋亡。肝癌裸鼠动物模型验证了WIN的抑瘤效果。该研究为大麻类物质治疗肝癌的临床应用研究奠定了一定的基础。.阶段性成果：1..该研究成果主要以1篇核心期刊论文发表的形式提供，另一篇SCI论文已经投稿至anticancer research杂志。.2..培养了两名硕士研究生：王映及肖顺华，均于2012年6月顺利答辩毕业并获得优秀毕业研究生奖励。.3..参加国内学术会议一次，参会论文题目: Apoptosis induced in HepG2 cells by WIN55,212-2 : Involvement of PPARγ and c-myc。.4.本人2012年12月29日举办学术会议一次，邀请美国明尼苏达大学hormel癌症研究所的廖德仲教授来广州医学院讲学。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
四氢大麻酚THC抑制肝癌细胞Bel-7402增殖和诱导其凋亡的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    时珍国医国药
  • 影响因子：
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  • 作者：
    赵青
  • 通讯作者：
    赵青

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  • 通讯作者：
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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