SOCS-1负调控核因子κB在树突状细胞介导热应激猪Th1/Th2飘移中的作用机制

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基本信息

  • 批准号：
    31101862
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    24.0万
  • 负责人：
    巨向红
  • 依托单位：
    广东海洋大学
  • 学科分类：
    C1809.临床兽医学
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

Th1/Th2飘移可能是热应激猪对传染性疫病敏感性增高的原因之一，搜寻介导飘移的上游调控网络可望揭示其发生机理。初步设想某些负调控物，阻断TLR信号通路使NF-κB活性降低，从而下调具有T-bet诱导效应的因子表达是热应激猪Th1/Th2飘移的主要原因。本研究拟运用荧光定量PCR、免疫印迹和基因沉默等方法，检测外周血淋巴细胞T-bet、GATA3、IFN-γ和IL-4变化，分析热应激不同时段猪Th1/Th2飘移规律；检测外周血DC细胞SOCS-1表达、Mal降解及NF-κB活性变化，探讨上游负调控网络与飘移的相关性；诱导分化获DC细胞，SOCS-1特异性RNAi载体转染，再热休克处理，检测Mal降解和NF-κB活性，并将上清添加至体外培养的幼稚CD4 T细胞中，分析SOCS-1缺陷对Th1/Th2飘移的影响。从而阐述SOCS-1负调控NF-κB在DC细胞介导Th1/Th2飘移中的作用机制。

结项摘要

Th1/Th2飘移可能是热应激猪对传染性疫病敏感性增高的原因之一，搜寻介导飘移的上游调控网络可望揭示其发生的分子机理。本课题组以在免疫和炎症过程中发挥重要作用的核因子кB为切入点，以免疫印迹、基因沉默、荧光定量、RT-PCR、细胞转染技术和流式细胞术等为技术手段，体内试验与体外实验相互印证，对正向调控物（Toll样受体）和负向调控物（细胞因子信号抑制物1，SOCS-1）在热应激条件下的调控机制及在Th1/Th2飘逸中的作用机制进行了深入研究，发现：① 从基因和蛋白水平探明热应激引起猪CD4 T淋巴细胞亚群Th1向Th2飘逸，Treg向Th17飘逸。这种CD4 T淋巴细胞的“双重失衡”可能是热应激猪免疫抑制的原因之一；② 体外条件下43.5℃/1h 热休克处理，能使IKB发生磷酸化及降解，激活了NF-κB信号通路而上调炎性因子IL-12的表达；③ 以转染HSP70的方法成功构建了基于HSP70高表达的体外热应激模型；④ 提高细胞中HSP70表达能显著活化NF-κB， SOCS1可抑制HSP70介导的NF-κB活化，且这种作用有赖于Mal蛋白的降解；⑤ SOCS1能抑制Th1诱导分化因子GATA3的表达，从而阻断热应激诱发的Th1向Th2飘逸过程。 ⑥ 同SOCS1在热应激调节过程中的作用类似，SOCS2、SOCS3和SOCS4均能抑制HSP70介导的NF-ΚB活化和下游炎性因子的表达，而且这种调控作用的发挥有赖于Mal蛋白的降解。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（2）
专利数量（0）
spanHeat stress upregulation of Toll-like receptors 2/4 and acute /spanspaninflammatory cytokines in peripheral blood mononuclear cell/spanbr /span(PBMC) of Bama miniature pigs: an in vivo and in vitro study
热应激对巴马小型猪外周血单个核细胞（PBMC）Toll样受体2/4和急性炎症细胞因子的上调：体内外研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Animal
  • 影响因子：
    3.6
  • 作者：
    X.-H. Ju;H.-J. Xu;Y.-H.Yong;L.-L. An;P.-R. Jiao;M. Liao
  • 通讯作者：
    M. Liao
strongHeat stress upregulates the expression of TLR4 and its alternative splicing variant in Bama miniature pigs/strong
热应激上调巴马小型猪TLR4及其可变剪接变异体的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Journal of Integrative Agriculture
  • 影响因子：
    4.8
  • 作者：
    Ju Xiang-hong;Xu Han-jing;Yong Yan-hong;AN Li-long;XU Ying-mei;JIAO Pei-rong;LIAO Ming
  • 通讯作者：
    LIAO Ming
猪SOCS3基因的克隆、生物信息分析及热应激条件下的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王萍;巨向红;雍艳红;贾汝敏;赵云涛;马铭龙;廖明
  • 通讯作者：
    廖明
猪SOCS1基因的克隆、生物信息分析及热应 激条件下的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    马铭龙;巨向红;雍艳红;贾汝敏;赵云涛;王 萍;廖明
  • 通讯作者：
    廖明
猪SOCS4基因的克隆生物信息学分析及热应激条件下的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王萍;巨向红;雍艳红;贾汝敏;马铭龙;赵云涛;廖明
  • 通讯作者：
    廖明

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其他文献

黄芩苷通过抑制核因子-κB和激活核因子-E2相关因子2信号通路缓解脂多糖诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激
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    刘晓曦
土杂猪SOCS2 基因的克隆、生物信息分析及热应激条件下的表达
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    广东海洋大学学报
  • 影响因子：
    --
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    马铭龙;巨向红;雍艳红;贾汝敏;赵云涛;王萍;廖明
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  • 期刊：
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  • 影响因子：
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    巨向红
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    --
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    巨向红
猪GM-CSF稳定表达细胞系的建立
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
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  • 作者：
    李俊敏;雍艳红;巩栋梁;冯园;韦璇;何玉林;巨向红
  • 通讯作者：
    巨向红

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肠道菌群代谢物SA经FABP5/STAT3途径诱导热应激猪pTh17分化的机制研究
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相似海外基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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