凝血因子IX R327I突变蛋白结构与功能的研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30770904
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    30.0万
  • 负责人：
    丁秋兰
  • 依托单位：
    上海交通大学
  • 学科分类：
    H0805.出血、凝血、纤溶与血栓
  • 结题年份：
    2010
  • 批准年份：
    2007
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2008-01-01 至2010-12-31

项目摘要

本项目将对自行发现的导致重型血友病的F9基因R327I突变的蛋白结构与功能进行研究，同时探讨该突变所在的β折叠结构域的特异性功能。利用定点突变及重叠PCR法分别构建R327I, R327A点突变及FIX β折叠结构域功能缺失型（替换为FVIIβ折叠结构域）和FVII功能获得型(替换为FIXβ折叠结构域）表达质粒，分别转染COS1细胞，通过G418筛选稳定表达株并大量培养，免疫亲和吸附法分离、纯化各种突变体蛋白，用激活剂活化各种突变体蛋白并用SDS凝胶电泳法检测。通过同位素标记竞争法检测R327I、R327A、功能缺失型和功能获得性突变体蛋白与FVIIIa结合力，发色底物法检测各种FIX突变体蛋白对底物（FX）的激活力等研究，阐明R327I突变导致血友病B的分子发病机制和突变所在的β折叠结构域的功能。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量（0）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）

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  • 通讯作者：
    CHEN Lin-sen

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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