IFN-tau调控奶牛胎盘滋养层上皮细胞BoLA-I表达的机制研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31072188
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    35.0万
  • 负责人：
    邓干臻
  • 依托单位：
    华中农业大学
  • 学科分类：
    C1809.临床兽医学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

BoLA-I时相性差异表达在奶牛妊娠建立或同种半异体免疫排斥中起关键作用。IFN-tau是反刍动物妊娠识别因子，对MHC-I表达具有调控作用，其在胎盘滋养层上皮细胞中分泌，但受体却在母体子宫。生殖激素、IFN-tau和BoLA-I在不同的孕期的表达是有差异的，但这三者的差异表达的内在关系至今尚不清楚。本项目旨在①建立胎盘滋养层上皮细胞体外培养技术；②检测不同孕期主要生殖器素水平；③通过体外模拟体内激素水平，采用RT-PCR技术和ELISA技术检测胎盘滋养层上皮细胞的IFN-tau的动态表达水平，研究不同孕期IFN-tau的表达特点；④通过不同浓度的激素和IFN-tau水平作用于体外培养的胎盘滋养层上皮细胞，采用RT-PCR技术检测BoLA-I表达水平，研究生殖激素、IFN-tau调节奶牛胎盘滋养层上皮细胞BoLA-I差异表达的分子机制。

结项摘要

BoLA-I时相性差异表达在奶牛妊娠建立或同种半异体免疫排斥中起关键作用。IFN-τ是反刍动物妊娠识别因子，对MHC-I表达具有调控作用。其在胎盘滋养层上皮细胞中分泌，但受体却在母体子宫。.项目采用奶牛孤雌胚体外培养和滋养层细胞体外纯化和培养技术、子宫上皮细胞培养技术、定量PCR技术、抗体自备技术、ELISA，Western Blot技术和免疫组化技术研究了生殖激素、IFN-τ和BoLA-I三者之间的调控关系。①定量PCR发现，高水平的孕酮(10ng/mL) 在12h和24h均显著地上调滋养层细胞 IFN-τ mRNA 表达(P<0.05)，但雌激素（25pg/mL和50pg/mL)在12h和24h均显著地下调IFN-τ 表达(P<0.05)。②ELISA检测发现，孕酮或雌二醇作用下的IFN-τ蛋白水平变化趋势与IFN-τ mRNA一致，但中等水平的孕酮（5ng/mL）作用下的IFN-τ浓度似乎更高(P<0.05) 。高水平的雌二醇（50pg/mL）在24h极显著地降低了IFN-τ蛋白浓度(P<0.01)。③定量PCR发现，不同浓度和作用时间的IFN-τ均显著地上调MIC1, BoLA-A, Heavy chain 和BoLA-N*01201（p＜0.05）。BoLA-NC1*，BoLA-NC3*，A11， BoLA-N*03101和BoLA-N*03701的表达几乎不受IFN-τ影响(p＞0.05)。④BoLA-A，Heavy chain和MIC1的Western Blot进一步了结果证实BoLA-I蛋白表达水平。以上研究结果说明，孕酮上调IFN-τ表达，雌激素抑制IFN-τ表达；IFN-τ差异调节BoLA-I表达。本研究揭示了生殖激素——IFN-τ——BoLA-I调控通路。.本项目研究揭示的“生殖激素—IFN-tau—BoLA-I”在奶牛妊娠建立中的时相关系，对进一步阐明妊娠的生理机制和分子机理具有显著的科学理论价值，为从分子水平研究选配选育技术和方法、提高动物受孕率奠定了理论基础和提供了技术措施，在动物生产领域具有较为广阔的应用前景。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Differential Expression of Bovine Leucocyte Antigen Class I Chain-Related Genes 2 in preganant Dairy Cows and Neonatal Calves
牛白细胞抗原I类链相关基因2在妊娠奶牛和新生犊牛中的差异表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    Journal of Animal and Veterinary Advances
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhang, Kechun;Zhang, Shen;Deng, Ganzhen;Li, Beibei;Wu, Yue;He, Mingyue;Wang, Xiao;Li, Chengye;Qiu, Changwei
  • 通讯作者：
    Qiu, Changwei

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其他文献

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AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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