系统性沉默组成型高表达HSPs探究日本血吸虫抗胁迫维自稳的应激机制

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81071378
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    36.0万
  • 负责人：
    周晓红
  • 依托单位：
    南方医科大学
  • 学科分类：
    H2203.寄生虫与感染
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

热休克蛋白（HSPs）超家族是应激胁迫反应体系最重要成员，在血吸虫抗胁迫维自稳作用中应扮演重要角色。本课题拟以日本血吸虫组成型高表达sHSP-SjP40（国家发明专利授权ZL 200310112186）、HSP90、HSP60、 HSP70为核心靶标，以MEGAscript RNAi kit合成dsRNA，对体外培养尾蚴、童虫、成虫和毛蚴进行RNAi，系统性沉默此4种HSP，观察在有无胁迫因子如温度、正常和感染动物血清、紫外致弱等处置情况下，HSPs在转录和蛋白质水平的改变，血吸虫抗胁迫应激能力评价，观察是否可实现又如何实现对血吸虫HSPs应激体系致以整体性致死性摧毁？旨在知晓其作用机制，终极目标期能系统性摧毁血吸虫HSPs系统，破坏血吸虫无时无刻不在的强大自稳调节能力，为以HSP核心靶蛋白或表位构建"鸡尾酒疫苗"新型配伍方案奠定前期工作基础，为血吸虫病及其它疾病疫苗研究探索新的途径。

结项摘要

HSPs超家族对生命体的抗应激胁迫作用一直是生命科学最为瞩目的研究热点，从维护生命体的自稳作用而言，HSPs超家族形成一个自成体系的调控网络，并在感染性疾病和肿瘤的防治研究中占有重要地位。对于血吸虫而言，HSPs同样在其生活史中占据重要的地位，在血吸虫抗胁迫维自稳得以繁衍生息的过程中的作用至关重要。本课题以日本血吸虫组成型高表达sHSP-Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90为核心靶标，以MEGAscript RNAi kit 合成dsRNA, 化学合成FAM荧光标记的siRNA, 成功建立了dsRNA浸泡法、dsRNA电转化法和siRNA电转化法，以进行sHSP-Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90在血吸虫生活史不同阶段的RNAi，结果：三种方法均能达到良好的干涉效应，Real time PCR 和Western blot 呈示在转录和蛋白质表达水平均呈明显下降，四种HSPs靶标分子间存在不同的协同反应，对虫体的生存状态和雌虫产卵等产生显著影响。四种HSPs靶标分子中高效特异的siRNA干涉小片段正在进一步的筛选中。本研究为下一步构建鸡尾酒式的HSPs-siRNA治疗体系和HSPs复合肽疫苗，以达成系统性摧毁日本血吸虫应激反应体系的远期目标，奠定了良好的科学基础。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（3）
专利数量（0）
转基因番茄Zeneca B,Da,F实时荧光定量PCR检测体系的建立
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    南方医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈敏芳;ZHOU Xiao-hong;莫倩珍;胡良勇;黎事伦;唐敏然;顾晓敏;蔡永洪;周伦彬
  • 通讯作者：
    周伦彬
快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    南方医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    莫倩珍;麦荣嘉;杨志晓;陈敏芳;杨铁钊;赖华芳;杨培梁;陈强;周晓红
  • 通讯作者：
    周晓红
日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    南方医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈敏芳;麦荣嘉;莫倩珍;周晓红
  • 通讯作者：
    周晓红

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  • 通讯作者：
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  • 发表时间：
    2019
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    高维娟
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    丁春华

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周晓红的其他基金

白纹伊蚊光周期性滞育母代效应传递的分子机制
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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