干预星型胶质细胞TRPV1自噬性降解：缺血性脑损伤的治疗新策略

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81102428
项目类别：
青年科学基金项目
资助金额：
14.0万
负责人：
黄超
依托单位：
华中科技大学
学科分类：
H3501.神经精神药物药理
结题年份：
2012
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2012-12-31

项目参与者：
龙利红；付晖；倪岚；熊秋菊；舒庆；汪慧芳；周伦；
关键词：
星型胶质细胞 TRPV1 自噬脑缺血

项目摘要

瞬时受体电位香草酸亚型-1(TRPV1)是一种配体门控通道，对阳离子具有非选择通透性，在功能上主要表现为参与痛觉感受等过程。虽然TRPV1存在于星型胶质细胞，但是其在该类细胞的功能目前还不清楚。星型胶质细胞在脑缺血中具有十分重要的作用，它的损伤可能引起神经元继发性死亡和缺血后梗死面积迟发性扩大。已知脑缺血能诱发自噬形成，而且缺血性细胞损伤通常与离子通道等的调控有关，因此我们推测脑缺血可能引起星型胶质细胞TRPV1发生变化，干预这种变化对缺血后星型胶质细胞损伤和脑损伤具有重要影响，我们的前期研究结果也初步表明缺血能导致星型胶质细胞TRPV1产生与自噬相关的自身降解。在此基础上，本课题将综合运用western blot、免疫共沉淀、电生理、RT-PCR、免疫荧光和小分子肽段合成等技术，研究由脑缺血引起的星型胶质细胞TRPV1变化及相关机制，并探讨干预TRPV1变化对缺血后脑损伤的影响。

结项摘要

星型胶质细胞既是脑内的支持性细胞，又是脑内的功能性细胞，它可以保护神经元或血管免受病理损害。星型胶质细胞的作用由多种离子通道介导，譬如NMDA受体等。我们的前期研究表明TRPV1和ASIC通道也存在于星型胶质细胞，但是它们在该类细胞的功能还不是很清楚。本课题深入探讨了缺血性刺激对星型胶质细胞TRPV1的影响及机制，同时，也研究了星型胶质细胞ASIC1在缺血性条件下产生的变化。所得结论从离体细胞水平较好地支持了项目计划书中关于缺血性损伤与星型胶质细胞TRPV1降解之间关系的研究。我们发现星型胶质细胞TRPV1和ASIC1对血清剥夺这个缺血性刺激产生相反的反应，即在Western blot结果中，TRPV1表达减少或完全消失，而ASIC1表达增加。通过使用膜片钳技术，发现记录到的星型胶质细胞TRPV1电流比例由对照组的91%降到血清剥夺组的66.7%，但是TRPV1电流幅值在血清剥夺前后保持不变；记录到的ASIC1电流比例由对照组的9%增加到33.3%。TRPV1的缺失并不是由蛋白酶体或溶酶体引起的蛋白降解引起，与蛋白聚集也无关。更为重要的是，TRPV1缺失的发生是一个快速，可逆和保守的过程。这个过程不由PKA，PKC和CaMKII介导。血清成分白蛋白和γ-球蛋白能部分抑制星型胶质细胞TRPV1的减少或消失，胰岛素没有这个作用。总之，这项研究发现了一个关于星型胶质细胞TRPV1和ASIC1对血清剥夺刺激的有趣反应，为我们理解TRPV1和ASIC1在星型胶质细胞相关性疾病中的作用提供了一个全新的角度。