CAMK2N1介导雄激素受体对前列腺癌抑制作用的机制研究

雄激素受体（AR）对前列腺癌（PCa）的促进生长作用被广泛认同，但新近发现AR对PCa有抑制生长作用。AR被阻断后，PCa细胞中具有促进细胞生长分化的钙调素依赖型蛋白激酶II（CaMKII）被激活而发挥抗肿瘤细胞凋亡作用，但AR和CaMKII之间的作用机制不明。CAMK2N1是新发现的人内源性CaMKII抑制基因，前期研究发现CAMK2N1受AR正调控，并能抑制PCa细胞生长和转移；有鉴于此，提出：CAMK2N1可能是AR对PCa抑制作用的关键因子的假说；本项目拟采用AR缺失的PC-3细胞系、裸鼠移植瘤和转移瘤模型为研究对象，运用新型RNAa技术激活CAMK2N1基因，观察该基因对规避CaMKII信号通路凋亡逃避及抑制肿瘤生长和转移的影响，通过基因测序、染色质免疫共沉淀、RT-PCR、Westernblot等手段，检测肿瘤细胞生长、增殖、侵袭及转移相关蛋白的表达或激活状况，以证明该假说。

雄激素依赖性前列腺癌在经过一段时间的雄激素阻断治疗后，几乎都发展为激素抵抗性前列腺癌，这是临床上的一个难题。钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制物（CAMK2N1）是新近发现的内源性钙调素依赖型蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）抑制物，据报道CAMK2N1与肿瘤的发生和生长相关，然而CAMK2N1是否参与了前列腺癌的发病尚不清楚。我们首先检测了人前列腺癌中CAMK2N1的蛋白以及mRNA表达水平，发现CAMK2N1在前列腺癌中表达显著降低。然后在体外实验上调前列腺癌细胞中CAMK2N1的表达，发现肿瘤细胞增殖受抑制、细胞周期暂停于G0/G1期，并且出现细胞凋亡。同时检测到IGF-1、ErbB2、VEGF下游激酶PI3K/AKT以及MEK/ERK介导的信号通路均被下调。反过来，我们又下调了前列腺癌细胞中CAMK2N1的表达，观察到了与前述相反的效应。在前列腺癌细胞中，我们还发现CAMK2N1与雄激素受体（AR）之间存在负反馈调节，激活AR可下调CAMK2N1表达，CAMK2N1则可通过CAMKII和AKT途径抑制AR的表达与活性。在前列腺癌患者中，我们观察到CAMK2N1与AR呈负相关，高表达CAMK2N1的前列腺癌患者无生化复发生存率更高。本项研究表明CAMK2N1在前列腺癌中起着抑癌基因的作用，CAMK2N1表达下降与肿瘤进展相关，意味着更差的临床预后。因此，CAMK2N1是一个潜在的肿瘤标志物，并且可作为治疗靶点，未来有望通过上调CAMK2N1表达来抑制前列腺癌生长。

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