拟穴青蟹卵巢滤泡细胞的旁分泌作用研究

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基本信息

  • 批准号：
    31472261
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    80.0万
  • 负责人：
    黄辉洋
  • 依托单位：
    厦门大学
  • 学科分类：
    C1903.水产生物繁殖与发育
  • 结题年份：
    2018
  • 批准年份：
    2014
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2015-01-01 至2018-12-31

项目摘要

The paracrine effect in the ovary of vertebrates plays important roles during oocytes development. As to crustaceans, little is known about the paracrine mechanism of ovary. In this project, we plan to carry out following researches on the mud crab Scylla paramamosain, an important culture crustacean: ⑴To screen differentially-expressed genes during different stages of ovarian development by transcriptomics analysis; ⑵To acquire cDNA sequences of significantly regulatory genes by molecular cloning; ⑶To clarify the localization of regulatory genes in follicle cells or oocytes by in-situ hybridization and immunohistochemistry;⑷To expound the regulatory effect of paracrine factors in follicle cells on oocytes development through functional verification,such as RNA interference and gene over-expression. As a result, we tempt to discover a series of genes related to the ovarian development in mud crab, and to reveal the reproductive regulatory mechanism from multi-gene levels. The identification of paracrine factors in follicle cells and the clarification of their paracrine effect will contribute to the comprehension of the mutual interaction between follicle cells and oocytes in mud crab. This project will develop a new research domain in crustacean reproduction, in that it will reveal the mechanism of crustacean ovary development through paracrine way, and also provide scientific supports for the innovation of spawn-inducing technology in crustacean, thus has great theoretical and practical importance.
脊椎动物卵巢的旁分泌作用对卵母细胞的发育具有重要调控作用，迄今甲壳类卵巢旁分泌作用机制尚未见诸报道。本项目以重要养殖甲壳类拟穴青蟹为对象，开展以下研究：(1)通过转录组学分析，筛选不同卵巢发育期差异表达基因；(2)通过分子克隆，获得重要调控基因的cDNA序列；(3)利用原位杂交和免疫组化技术，明确旁分泌因子在滤泡细胞/卵母细胞的定位；(4)开展RNA干扰、基因过表达等技术进行功能验证，确认滤泡细胞中的旁分泌因子对卵母细胞发育的调控作用。本项目拟发掘一批与青蟹卵巢发育相关的基因，从多基因水平较全面地揭示生殖调控机制。有关滤泡细胞旁分泌因子的确定和旁分泌作用的阐明，对了解青蟹滤泡细胞与卵母细胞之间的相互作用将具有重要意义。该项目开辟了甲壳类生殖研究的一个新领域，不仅从旁分泌途径开展甲壳类卵巢发育机制的研究，其结果还可为甲壳类诱导产卵技术的创新提供科学依据，具有重要的理论意义和潜在的应用价值。

结项摘要

脊椎动物卵巢的旁分泌作用对卵母细胞的发育具有重要调控作用，迄今甲壳类卵巢旁分泌作用机制尚未见诸报道。本项目以重要养殖甲壳类拟穴青蟹为对象，开展以下研究：(1)通过转录组学分析，筛选不同卵巢发育期差异表达基因；(2)通过分子克隆，获得重要调控基因的cDNA序列；(3)利用原位杂交和免疫组化技术，明确旁分泌因子在滤泡细胞/卵母细胞的定位；(4)开展RNA干扰、基因过表达等技术进行功能验证，确认滤泡细胞中的旁分泌因子对卵母细胞发育的调控作用。本项目发掘了BMP7、ILP、sNPF、EcR、RXR等青蟹卵巢发育相关的基因，从多基因水平较全面地揭示生殖调控机制。有关滤泡细胞旁分泌因子的确定和旁分泌作用的阐明，对了解青蟹滤泡细胞与卵母细胞之间的相互作用将具有重要意义。该项目开辟了甲壳类生殖研究的一个新领域，不仅从旁分泌途径开展甲壳类卵巢发育机制的研究，其结果还可为甲壳类诱导产卵技术的创新提供科学依据，具有重要的理论意义和潜在的应用价值。

项目成果

期刊论文数量（8）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
The retinoid X receptor from mud crab: new insights into its roles in ovarian development and related signaling pathway.
泥蟹类视黄醇X受体：对其在卵巢发育和相关信号通路中的作用的新见解
  • DOI：
    10.1038/srep23654
  • 发表时间：
    2016-03-24
  • 期刊：
    Scientific reports
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Gong J;Huang C;Shu L;Bao C;Huang H;Ye H;Zeng C;Li S
  • 通讯作者：
    Li S
In vitro stimulation of vitellogenin expression by insulin in the mud crab, Scylla paramamosain, mediated through PI3K/Akt/TOR pathway
胰岛素通过 PI3K/Akt/TOR 通路介导体外刺激青蟹中卵黄蛋白原的表达
  • DOI：
    10.1016/j.ygcen.2017.06.013
  • 发表时间：
    2017-09-01
  • 期刊：
    GENERAL AND COMPARATIVE ENDOCRINOLOGY
  • 影响因子：
    2.7
  • 作者：
    Huang, Xiaoshuai;Feng, Biyun;Ye, Haihui
  • 通讯作者：
    Ye, Haihui
A bone morphogenetic protein ligand and receptors in mud crab: A potential role in the ovarian development
泥蟹中的骨形态发生蛋白配体和受体：在卵巢发育中的潜在作用
  • DOI：
    10.1016/j.mce.2016.06.023
  • 发表时间：
    2016-10
  • 期刊：
    Molecular and Cellular Endocrinology
  • 影响因子：
    4.1
  • 作者：
    Shu Ling;Yang Yanan;Huang Huiyang;Ye Haihui
  • 通讯作者：
    Ye Haihui
Insights into insulin-like peptide system in invertebrates from studies on IGF binding domain-containing proteins in the female mud crab, Scylla paramamosain
通过对雌性泥蟹（Scylla paramamosain）中含有 IGF 结合域的蛋白质的研究，深入了解无脊椎动物中的胰岛素样肽系统
  • DOI：
    10.1016/j.mce.2015.08.019
  • 发表时间：
    2015-11-15
  • 期刊：
    MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY
  • 影响因子：
    4.1
  • 作者：
    Huang, Xiaoshuai;Ye, Haihui;Huang, Huiyang
  • 通讯作者：
    Huang, Huiyang
Does the bone morphogenetic protein 7 inhibit oocyte maturation by autocrine/paracrine in mud crab?
骨形态发生蛋白 7 是否通过自分泌/旁分泌抑制青蟹卵母细胞的成熟？
  • DOI：
    10.1016/j.ygcen.2018.05.004
  • 发表时间：
    2018-09
  • 期刊：
    General and Comparative Endocrinology
  • 影响因子：
    2.7
  • 作者：
    Yang Ya'nan;Shu Ling;Jiang Qingling;Huang Huiyang;Ye Haihui
  • 通讯作者：
    Ye Haihui

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其他文献

锯缘青蟹脑中FSH和LH的免疫识别
  • DOI：
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  • 期刊：
    自然科学进展，2006, 16(6)：768~770
  • 影响因子：
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    叶海辉;黄辉洋;李少菁;王桂忠
  • 通讯作者：
    王桂忠
4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化
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  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    厦门大学学报(自然科学版)
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  • 作者：
    冯碧云;黄辉洋;叶海辉;尚丽丽;李少菁
  • 通讯作者：
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    厦门大学学报(自然科学版)
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  • 通讯作者：
    刘元婧
锯缘青蟹视神经节FSH和LH的免疫
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    叶海辉;黄辉洋;李少菁;王桂忠
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    王桂忠
利用免疫组化方法初步鉴定雌性三疣梭子蟹视神经节GnRH受体
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  • 期刊：
    水产学报
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  • 作者：
    尚丽丽;黄辉洋;叶海辉;冯碧云;李少菁
  • 通讯作者：
    李少菁

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黄辉洋的其他基金

锯缘青蟹卵母细胞成熟和受精过程的Cyclin-CDK分子机制
  • 批准号：
    40406030
  • 批准年份：
    2004
  • 资助金额：
    25.0 万元
  • 项目类别：
    青年科学基金项目

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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