研究Notch信号通路在细粒棘球绦虫感染及抗感染中的免疫作用

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81160203
项目类别：
地区科学基金项目
资助金额：
50.0万
负责人：
王娅娜
依托单位：
宁夏医科大学
学科分类：
H2203.寄生虫与感染
结题年份：
2015
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
张艳丽；朱永生；丁淑琴；党洁；朱明星；王强；朱佳佳；刘丽华；王元；
关键词：
Treg细胞细粒棘球蚴 DC Notch

项目摘要

通过以RBP-J条件性基因剔除小鼠为基础，构建的细粒棘球蚴感染及重组抗原Eg.ferritin和EgmMDH免疫后再感染模型的各组小鼠，通过体内、体外，正反两方面，动态的比较基因剔除小鼠及正常小鼠的Notch信号通路下游靶分子表达、DC细胞发育及分化的变化和调节性T细胞的研究，初步探索Notch信号通路在寄生虫感染免疫、抗感染及免疫逃逸或免疫耐受中的分子机制。为细粒棘球蚴病疫苗的研制和应用提供理论指导。同时明确在寄生虫感染过程中，通过上调或下调Notch信号通路中配体或受体的表达，增强或抑制Notch 通路，从而影响DC细胞的分化发育及功能，进而影响T细胞的活化和分化, 调节机体的免疫的分子机制。这可能成为治疗寄生虫感染的新途径。

结项摘要

前期研究细粒棘球蚴重组抗原Eg.ferritin免疫小鼠可以产生86.5%的免疫保护水平，但同时也发现了重组抗原Eg10和Eg.mMDH 免疫小鼠未产生免疫保护能力，甚至加重了感染。为什么不同重组抗原进入机体诱发的免疫机制不同呢？在这个过程中树突状细胞DC发挥着非常重要的作用，抗原对DC功能的影响将导致DC参与或介导不同的免疫应答，Notch信号通路是一个新发现的参与外周免疫反应调控的重要的信号途径，研究发现阻断Notch信号通路可以改变DC的发育命运。利用改变Notch信号通路观察Notch信号是否在细粒棘球蚴抗感染免疫及免疫耐受中发挥了作用。本课题通过(1)观察不同的细粒棘球绦虫重组抗原对小鼠骨髓树突状细胞BMDC功能的影响及诱导T细胞分化情况;(2)观察不同重组抗原对Notch信号通路阻断模型RBP-J条件性剔除小鼠的DC的功能的影响;(3)体外模拟Notch信号通路阻断模型，通过Notch信号通路阻断剂DAPT和增强剂Jagged 1对正常小鼠DC进行处理，观察不同抗原对DC发育及功能的影响。通过体内体外，正反两方面探讨不同重组抗原免疫小鼠产生的不同免疫机制，同时初步了解Notch信号通路是否参与细粒棘球绦虫感染抗感染免疫。结果显示：重组抗原rEg.ferritin能够刺激DC成熟，增强DC迁移能力及诱导T细胞的增殖，分泌大量的Th1及Th2型细胞因子；而rEg10及rEg. mMDH 则不能有效刺激DC成熟，DC表面分子表达，迁移能力及诱导T细胞增殖能力均很弱，能诱导高水平CD4+CD25+Treg细胞，它们均诱导DC分泌Th2型细胞因子，扫描电镜显示这两组DC表面突起数目明显较少，细胞形态小。通过用重组抗原rEg.ferritin 及rEg10和rEg. mMDH对 RBP-J条件下剔除小鼠的DC进行致敏，结果发现 rEg.ferritin 不能刺激DC成熟，说明Notch信号通路的阻断影响DC的发育及功能。通过体外模拟Notch信号通路阻断或增强情况, DAPT能抑制单核细胞向DC的发育及成熟分化，致使DC功能不全，显著下调DC表面分子的表达减弱了rEg.ferritin和LPS对DC的致敏能力。从而抑制rEg.ferritin和LPS诱导机体产生的免疫应答反应。Jagged 1 介导的Notch信号通路可能参与rEg10诱导机体产生的免疫应答。