门冬酰胺合成酶互作蛋白与左旋门冬酰胺酶耐药的相关性研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81000227
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    19.0万
  • 负责人：
    何映谊
  • 依托单位：
    广州医科大学
  • 学科分类：
    H0809.白血病
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

目前研究认为幼稚淋巴细胞内门冬酰胺合成酶（ASNS）活性增高是L-Asp的耐药机制之一。ASNS是一种看家基因，在细胞浆中发挥酶活性的功能。我们在前期研究中首次发现了ASNS还定位在细胞膜上，L-Asp能促进U937细胞膜上ASNS表达上调，由此提示ASNS具有除酶活性以外的另一种新功能。已有研究表明白血病细胞经L-Asp处理后，细胞膜上氨基酸转运体上调。基于上述，课题申请者推测ASNS位于细胞膜表面与细胞内外的氨基酸转运有关，L-Asp可能促使ASNS在细胞膜上表达增加，ASNS与氨基酸转运体相互作用，通过增强后者的转运能力而介导了L-Asp耐药。本课题通过串联亲和纯化技术探讨ASNS的互作蛋白将有助于阐明这些可能机制。从ASNS亚细胞定位及功能研究的层面探讨L-Asp在白血病耐药中的机制，将有助于更深层次以及更全面认识L-Asp的耐药机制，同时也将促进临床个体化治疗以及新药的开发。

结项摘要

成功引入左旋门冬酰胺酶(L-Asp)的联合化疗是提高儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）远期疗效一大主要原因。最近有观点认为L-Asp对某些亚型的急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）也有良好的治疗效果。更重要的是：L-Asp的耐药程度直接影响临床预后。深入研究L-Asp的耐药机制，对改善儿童ALL预后、逆转因化疗耐药而复发，以及儿童白血病的个体化治疗中有着重要意义。目前研究认为幼稚淋巴细胞内门冬酰胺合成酶（asparagine synthetase, ASNS）活性增高是L-Asp的耐药机制之一，但也存在相反的结论。课题申请者认为，仅仅从ASNS mRNA基础表达水平似乎并不能完全解释L-Asp的耐药问题，目前对某些机制仍然知之甚少。课题申请者认为，ASNS不仅能指导门冬酰胺的合成，还可能参与了细胞某些重要生命活动，ASNS的亚细胞定位可能与其功能异质性相关。课题申请者构建了携带Flag 标签的ASNS基因真核细胞表达载体、杂交瘤方法制备ASNS的单克隆抗体，通过免疫荧光实验显示ASNS位于pIRES-GFP-Flag-AsnS/Neo转染组的细胞膜表面，分离细胞膜蛋白进行Westen blot分析同时证实了这一现象。U937细胞在L-Asp处理后，细胞膜的ASNS表达增强。ASNS分布于细胞膜上的现象可能提示了ASNS具有除酶活性以外的另一种新功能。细胞膜上的ASNS可能与氨基酸转运体相互作用，通过增强后者的转运能力而介导L-Asp耐药。通过构建慢病毒pLVX-IRES-ASNS过表达U937细胞系，串联亲和纯化（Tandem Affinity Purifieation,TAP）技术分离出U937稳定过表达ASNS细胞系细胞膜上的ASNS蛋白质复合体，目前正通过质谱分析对获得的互作蛋白的可信度和生物学相关性进行系统评价。但由于高度分化的细胞中目标蛋白质含量很低，纯化出的蛋白质复合体量较少，目前我们正通过选择更广泛亲和性和洗脱效率更高的TAP标签提高蛋白结合率及蛋白纯化效率。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
左旋门冬酰胺酶诱导急性髓系白血病细胞凋亡的实验研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    中华血液学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    何映谊;李本尚;顾龙君;罗长缨;沈树红;江华;陈静;薛惠良;汤静燕
  • 通讯作者：
    汤静燕
L-asparaginase induces AML U937 cells apoptosis via an AIF-mediated mechanism
L-天冬酰胺酶通过 AIF 介导的机制诱导 AML U937 细胞凋亡
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Front Biosci (Landmark Ed).
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    何映谊
  • 通讯作者：
    何映谊

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--"}}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--" }}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--"}}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

其他文献

其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--" }}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--"}}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--" }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}
empty
内容获取失败，请点击重试
重试联系客服
title开始分析
查看分析示例
此项目为已结题，我已根据课题信息分析并撰写以下内容，帮您拓宽课题思路：

AI项目思路

AI技术路线图

相似国自然基金

{{ item.name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 批准年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}

相似海外基金

{{ item.name }}
{{ item.translate_name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 财政年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}
{{ showInfoDetail.title }}

作者：{{ showInfoDetail.author }}

知道了

AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
关闭
close
客服二维码