宫内发育迟缓猪胚胎期T细胞发育规律及共轭亚油酸的营养调控研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
31172216
项目类别：
面上项目
资助金额：
56.0万
负责人：
赖长华
依托单位：
中国农业大学
学科分类：
C1705.动物营养学
结题年份：
2015
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
纪颖；左磊；李鹏飞；尼健君；李藏兰；
关键词：
宫内发育迟缓胎猪 T细胞 Notch通路共轭亚油酸

项目摘要

胎儿宫内发育迟缓（IUGR）是胎儿在母体子宫内发育障碍的总称，表现为出生体重低，各组织器官形态和功能发育不完善，出生后生长发育迟缓，饲料利用率降低。IUGR现象随着母猪产仔率的逐渐提高而越来越严重，给畜牧生产带来很大的经济损失。造成IUGR猪高发病率高死亡率的一个重要因素是免疫系统的发育及功能不完善。T细胞是重要的免疫细胞，在细胞免疫中起着重要作用。因此，能否通过营养调控以缓解IUGR对畜牧业的危害成为动物营养学家关注的问题。共轭亚油酸（CLA）能增强断奶仔猪的免疫功能，但CLA能否促进T细胞的早期发育，目前还未见任何报道。本项目拟通过研究胚胎期IUGR猪T细胞的发育规律，探讨在此过程中起调控作用的Notch信号通路的受体和配体基因在胸腺中的表达及定位，确定哪些基因在胚胎期的哪个阶段参与了T细胞发育的调控，并通过体外试验揭示CLA对T细胞早期发育的营养调控作用。

结项摘要

胎儿宫内发育迟缓（IUGR）是胎儿在母体子宫内发育障碍的总称，通常表现为出生体重低，各组织器官形态和功能发育不完善，出生后生长发育缓慢甚至死亡，饲料利用率低，给养猪生产带来很大的经济损失。造成IUGR猪高发病率高死亡率的一个重要因素是免疫系统的发育及功能不完善。T细胞是重要的免疫细胞，在细胞免疫中起重要作用。如果能通过营养调控IUGR猪T细胞的发育将会缓解IUGR对养猪业的危害与损失。因此，本项目通过动物实验研究了胚胎期第60、90和110天这几个阶段IUGR猪胸腺T细胞的发育规律，以及这些阶段T细胞发育过程中起调控作用的Notch信号通路的受体和配体基因在胸腺中的mRNA和蛋白质表达，再通过体外细胞培养实验研究了共轭亚油酸和IGF-I对胚胎期IUGR猪T细胞的发育及对Notch信号通路各基因表达的影响。体内动物实验得出：胚胎发育期的第60 天，与正常胎猪相比，IUGR胎猪双阳性T细胞占胸腺中总淋巴细胞的比例低0.4%，IUGR胎猪CD8+ T细胞占总T细胞的比例低3.14%。第90和110 天，IUGR胎儿的CD8+ T细胞占胸腺中总淋巴细胞的比例分别比正常胎儿低0.13%和0.19%。IUGR胎猪第110 d时，Notch2和Delta-like4 mRNA表达量分别比正常胎猪高20.93%和低0.77%，而第90 d Delta-like1 mRNA表达量则高0.19%。第60 d，IUGR胎猪Delta-like1蛋白表达量比正常胎猪低169.85%。体外细胞实验结果表明，在培养液中添加CLA和IGF-Ι都能促进CD4+和CD8+ T细胞形成，只是在不同时间点CD4和CD8 T细胞的比例不同，说明添加CLA和IGF-Ι能不同程度的刺激T细胞的增殖，促进双阳性 T细胞转化为CD4+和CD8+ T细胞，且转化为CD8+ T细胞的能力大于转化为CD4+ T细胞的能力，且时间不能超过3 d。在细胞培养全期，添加CLA和IGF-Ι能促进Notch通路中Delta-like1 mRNA、 Delta-like4和Notch2 mRNA的表达。体内和体外实验表明，出生后IUGR仔猪某些T细胞亚群组成比正常仔猪低是胚胎期T细胞发育不同造成的。而CLA和IUGR可通过调控Notch信号通路促进IUGR猪T细胞的发育，从而增强IUGR猪的细胞免疫功能。