采用SPAD方法发现新的肿瘤/睾丸抗原

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30901358
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    宋朝君
  • 依托单位：
    中国人民解放军第四军医大学
  • 学科分类：
    H1806.肿瘤免疫
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

由于肿瘤抗原的低免疫原性和肿瘤细胞多种免疫逃逸机制，使肿瘤免疫治疗无法取得显著进展。肿瘤/睾丸抗原（CTA）的发现，为肿瘤免疫治疗带来新希望。CTA对全面认识肿瘤发生的分子机制、促进肿瘤免疫诊断和治疗的发展具有非常重要的意义。目前已有筛选方法，因其本身的局限性限制了它们的广泛应用。本课题拟利用CTA限制性表达于睾丸组织的特点，建立一种新的筛选和鉴定未知CTA方法（SPAD）。以人生精细胞免疫小鼠，收集免疫血清（含生精细胞特异性多抗），并以此多抗行免疫细胞化学染色筛选人睾丸cDNA NIH3T3细胞表达文库，通过激光显微切割分离阳性细胞，单细胞PCR技术扩增睾丸特异性分子，测序并检索数据库，获得全长序列。根据这些分子的表达谱，确定候选CTA分子。制备候选CTA分子单抗，在蛋白水平明确候选分子的表达规律，确定新的CTA分子，为肿瘤治疗提供更多新候选靶分子，为肿瘤疫苗设计提供新思路和策略。

结项摘要

由于肿瘤抗原的低免疫原性和肿瘤细胞多种免疫逃逸机制，使肿瘤免疫治疗无法取得显著进展。肿瘤/睾丸抗原（CTA）的发现，为肿瘤免疫治疗带来新希望。CTA对全面认识肿瘤发生的分子机制、促进肿瘤免疫诊断和治疗的发展具有非常重要的意义。目前已有筛选方法，因其本身的局限性限制了它们的广泛应用。.本课题利用CTA限制性表达于睾丸组织的特点，建立了一种新的筛选和鉴定未知CTA方法（SPAD）。以人生精细胞免疫小鼠，收集免疫血清（含生精细胞特异性多抗），并以此多抗行免疫细胞化学染色筛选人睾丸cDNA NIH3T3细胞表达文库，通过激光显微切割分离阳性细胞，单细胞PCR技术扩增睾丸特异性分子，测序并检索数据库，获得全长序列。根据这些分子的表达谱，确定候选CTA分子。. 经过课题组成员三年的努力，成功建立了SPAD方法，进行了上千次的激光显微切割，经过测序获得了297个在睾丸组织中表达的分子的基因序列，在此基础上，确定了4种CTA候选分子。重组表达了4种分子并成功制备了可用于免疫组织化学染色的候选CTA分子的单抗，免疫组化结果显示，2个分子定位于细胞膜，1个分子定位于胞浆，另外1个分子定位于细胞核。进一步的免疫组化结果显示，4种分子在睾丸组织和多种肿瘤组织中高表达，正常组织中低表达，符合CTA的表达分布规律。4种新的CTA的发现必将为肿瘤治疗提供更多新候选靶分子，为肿瘤疫苗设计提供新思路和策略。. 在基金的资助下发表了3篇SCI收录论文，单篇最高影响因子4.555。获国家实用新型专利授权2项。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Heterogeneous Expression of CT10, CT45 and GAGE7 Antigens and their Prognostic Significance in Human Breast Carcinoma
CT10、CT45 和 GAGE7 抗原在人乳腺癌中的异质表达及其预后意义
  • DOI：
    10.1093/jjco/hys236
  • 发表时间：
    2013-03-01
  • 期刊：
    JAPANESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Zhou, Xingchun;Yang, Fan;Jin, Boquan
  • 通讯作者：
    Jin, Boquan

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其他文献

截短型BAP31／GST基因重组质粒的构建及融合蛋白的表达、纯化和鉴定
  • DOI：
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  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    孙元杰;李海涛;刘志佳;金伯泉;宋朝君;张葵;李永明;刘飞;魏玉英;杨琨
  • 通讯作者：
    杨琨
抗IL-13R2单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    陈丽华
截短型肿瘤抗原BAP31 DNA疫苗的构建及免疫效果分析
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  • 发表时间：
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    第四军医大学学报
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    宋朝君;杨安钢;张贇;杨琨;魏玉英;金伯泉;孙元杰
  • 通讯作者：
    孙元杰
抗大鼠Nogo分子单抗的制备与初步鉴定
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    细胞与分子免疫学杂志
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  • 作者：
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Nogo-A在成年大鼠脑内神经元的分布
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    鞠躬

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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