水通道蛋白8对肠粘膜屏障的调节作用

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基本信息

  • 批准号：
    30901421
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    徐皓
  • 依托单位：
    南京医科大学
  • 学科分类：
    H0304.消化道内环境紊乱、黏膜屏障障碍及相关疾病
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

肠上皮细胞之间的紧密连接是构成肠粘膜屏障的重要结构。水通道蛋白（AQPs）不但在小肠吸收分泌等重要生理功能中发挥着重要作用，还可能调控小肠粘膜的紧密连接。我们推测水通道蛋白8（AQP8）可能通过磷酸激酶C（PKC）途径调控肠道紧密连接相关蛋白的表达，进而影响肠粘膜屏障的功能。在本研究中，我们将在体外建立AQP8沉默的Caco-2细胞单层肠上皮系统，研究AQP8对肠上皮细胞紧密连接相关蛋白的表达以及对肠上皮细胞屏障功能的影响，并检测PKC信号转导通路，探讨AQP8对紧密连接相关蛋白调节的机制。体内试验部分：从肠系膜上动脉注射大鼠AQP8表达质粒，3日后建立大鼠小肠粘膜屏障功能受损的动物模型，观察AQP8对大鼠小肠粘膜屏障功能的影响。本研究将初步阐述水通道蛋白与肠上皮细胞紧密连接、肠粘膜屏障的关系，探讨肠粘膜屏障损伤的可能细胞生物学机制，为今后肠粘膜屏障功能损伤的治疗提供新的思路。

结项摘要

水通道蛋白（aquaporins，AQPs）是一组分子量约30kDa（单体）疏水性膜转运蛋白家族，属于主要固有蛋白（major intrinsic protein，MIP）家族。有研究发现AQP3在胃肠道细胞基底膜上表达，但其在肠屏障功能的影响尚不清楚。在这里，我们发现沉默AQP3后，引起TEER明显减少和LY增加，并呈剂量依赖。Western blot揭示Claudin-1和Occludin在AQP3沉默组的表达明显下降，从而证明这种处理可以通过开放紧密连接复合物从而增强旁细胞通透性。这些结果不仅描述了人体肠道的跨细胞及细胞旁途径之间的相关性，还显示了沉默AQP3后可能会损害肠道屏障的完整性。在另一项研究中，SGC7901细胞沉默或过度表达AQP3后，我们发现MT1-MMP，MMP-2，MMP-9的表达在AQP3沉默组显著减少，而在过度表达AQP3后，MT1-MMP，MMP-2，和MMP-9的表达明显上升。我们还发现，AQP3沉默后导致磷酸化的AKT Ser473显着减少。我们的研究结果显示，AQP3在人胃癌SGC7901细胞中可能通过PI3K/AKT信号通路正调控基质金属蛋白酶的蛋白表达。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
水通道蛋白3与紧密连接的相关性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    世界华人消化杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张文杰;徐勇;王斌;徐皓;Wen-Jie Zhang,Yong Xu,Bin Wang,Hao Xu,Department o
  • 通讯作者：
    Wen-Jie Zhang,Yong Xu,Bin Wang,Hao Xu,Department o
Knockdown of aquaporin 3 is involved in intestinal barrier integrity impairment
水通道蛋白 3 的敲低与肠道屏障完整性受损有关
  • DOI：
    10.1016/j.febslet.2011.08.045
  • 发表时间：
    2011-10-03
  • 期刊：
    FEBS LETTERS
  • 影响因子：
    3.5
  • 作者：
    Zhang, Wenjie;Xu, Yong;Xu, Hao
  • 通讯作者：
    Xu, Hao
胃癌中水通道蛋白3的表达与淋巴结转移的关系
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    南京医科大学学报(自然科学版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    徐勇;张文杰;杨力;徐泽宽;徐皓;XU Yong,ZHANG Wen-jie,YANG Li,XU Ze-kuan,XU Hao (D
  • 通讯作者：
    XU Yong,ZHANG Wen-jie,YANG Li,XU Ze-kuan,XU Hao (D
AQP5基因重组慢病毒载体的构建与鉴定
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    山东医药
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张文杰;WANG Bin;XU Ze-kuan;YANG Li;SHEN Li-zong;XU Hao;徐勇;王斌;徐泽宽;杨力;沈历宗;徐皓;ZHANG Wen-jie;XU Yong
  • 通讯作者：
    XU Yong
Aquaporin-3 positively regulates matrix metalloproteinases via PI3K/AKT signal pathway in human gastric carcinoma SGC7901 cells
Aquaporin-3 通过 PI3K/AKT 信号通路正向调节人胃癌 SGC7901 细胞中的基质金属蛋白酶
  • DOI：
    10.1186/1756-9966-30-86
  • 发表时间：
    2011-09-25
  • 期刊：
    JOURNAL OF EXPERIMENTAL & CLINICAL CANCER RESEARCH
  • 影响因子：
    11.3
  • 作者：
    Xu, Hao;Xu, Yong;Xu, Zekuan
  • 通讯作者：
    Xu, Zekuan

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  • 作者：
    徐皓
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    徐皓

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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