壮医药线点灸对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响

Rheumatoid arthritis is a common rheumatic diseases, prone articular bone destruction and disability on early stage,causing great harm to the patients physical and mental health,being a heavy financial burden to families and society.Although the early joint use of slow-acting drugs has certain effect,but there are still many patients inevitably with articular bone destruction and deformity.In recent years, biologics become new ways of treatment of rheumatoid arthritis,however, with the use of these drugs to promote,secondary infection (especially tuberculosis) and other side effects also gradually increased.Medicated thread moxibustion is a folk External treatment of Zhuang medicine in Guangxi,having advantages of simple, convenient, inexpensive, little side effect and efficacy.On the basis of observing the impact of Medicated Thread Moxibustion of Zhuang Traditional Medicine treatment on rheumatoid arthritis patients with TNF-a, IL-1β,this project use real-time fluorescence quantitative PCR technology and Western blot to detect the expression changes before and after the treatment on adjuvant arthritis rats in NF-κB、IκB、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA and COX-2mRNA expression in the synovial tissuee,and apoptosis of synovial cells are also observed using flow cytometry and immunonhistochemistry methods. Explore the mechanism of action and key targets of Medicated thread moxibustion Zhuang Traditional Medicine treatment medicine theory system to provide a theoretical basis for the promotion of Zhuang medicine medicated thread moxibustion therapy, and further improve Zhuang medicine theory system.

类风湿关节炎是常见风湿性疾病，早期易出现关节骨破坏而致残，给患者和家庭带来极大危害和沉重经济负担。虽然早期联合使用慢作用药治疗取得一定的疗效，但仍有很多患者不可避免出现关节骨破坏和畸形。生物制剂成为近年治疗类风湿关节炎新途径，但随着此类药物推广运用，继发感染（特别是结核）等副作用也逐渐增多。药线点灸是广西民间传统的壮医外治疗法，具有简、便、廉和副作用小的优点，且疗效确切。本项目在观察壮医药线点灸对类风湿关节炎患者TNF-a、IL-1β影响基础上，运用实时荧光定量PCR技术、蛋白质印迹法检测壮医药线点灸治疗后佐剂关节炎大鼠NF-κB、IκB、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、COX-2mRNA表达变化，并用流式细胞仪和免疫组化法观察大鼠滑膜细胞凋亡。探讨壮医药线点灸治疗类风湿关节炎的作用机制和关键靶点，为壮医药线点灸疗法的推广提供理论基础，进一步完善壮医理论体系。

类风湿性关节炎（RA）是常见的风湿性疾病，严重影响患者的生活质量。壮医药线点灸是广西民间传统的壮医外治疗法，用于RA治疗具有简、便、廉和副作用小的优点，疗效确切。但是其作用机制尚不清楚。本课题通过建立佐剂关节炎大鼠模型，壮医药线点灸干预治疗，结果显示药线点灸干预治疗能够显著降低大鼠关节炎指数，改善关节炎症状。病理分析结果显示，经过药线点灸干预后，大鼠关节滑膜病理结构显著改善，提示药线点灸对改善关节炎疗效确切。为进一步探究其作用机制，分别从细胞凋亡和抗炎两个角度对药线点灸作用机制进行探讨。细胞凋亡方面，药线点灸干预能够显著促进关节滑膜细胞凋亡，并下调Bcl-2蛋白表达，上调Bax蛋白表达，提示药线点灸可能通过调控Bcl-2信号通路，促进关节滑膜细胞凋亡，从而改善关节炎症状，发挥治疗作用。抗炎方面，药线点灸干预联合甲氨蝶呤治疗能够显著抑制大鼠外周血中TNF-ɑ、IL-1β等炎症因子水平，下调P65、TNF-ɑ、IL-1β和COX-2 mRNA和蛋白表达水平，上调I-kBα mRNA和蛋白表达水平。提示壮医药线点灸联合甲氨蝶呤优于甲氨蝶呤单独给药，且壮医药线点灸联合甲氨蝶呤改善大鼠关节炎症状作用机制可能是通过调控NF-κB/IκB信号通路，从而抑制炎症因子释放和环氧化酶的表达来实现的。在本课题经费支持下，开展两项临床研究。观察了壮医药线点灸治疗对类风湿关节炎患者IL-17、IL-23的影响，明确了壮医药线点灸治疗可显著降低类风湿关节炎患者血清中IL-17、IL-23水平。并开展了壮医药线点灸联合壮医火针治疗类风湿关节炎的临床观察研究，明确了在常规药物治疗基础上结合壮医药线点灸联合壮医火针可有效改善类风湿关节炎患者临床症状及体征，并减轻炎性反应。以上研究成果发表论文5篇，其中核心期刊4篇。课题实施期间，课题组成员晋升副主任医师3人，成为开展壮医药治疗骨干，1人入选第六批全国老中医药专家学术经验继承人。剩余经费计划用于浸泡壮医药线的壮药水提取物作用于破骨细胞分子靶点的进一步研究。壮族是我国人口最多的少数民族，壮医药线点灸疗法在广西流传多年，该治疗方法简单易行，一般无毒副作用，而且治疗费用低廉，绝大多数患者均能承受。我们利用现代科学方法研究壮医药线点灸疗法的治疗机制，为临床应用壮医药线点灸治疗RA提供了实验理论支持，进一步丰富了壮医药科学的内涵。

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