腺病毒核心蛋白遗传标记方法的建立及其应用研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31070137
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    34.0万
  • 负责人：
    夏海滨
  • 依托单位：
    陕西师范大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

腺病毒的标记方法大概分为两大类即化学标记与遗传标记，对研究腺病毒感染机制及动物体内腺病毒的追踪过程具有重要的意义。同化学标记方法相比较，遗传标记具有标记效率高及标记后病毒活力高等明显的优点。目前腺病毒的遗传标记主要是采用对腺病毒衣壳蛋进行遗传标记，如pIX蛋白的荧光遗传标记。在病毒染细胞后，所标记的衣壳蛋白将会脱落，因此对腺病毒衣壳蛋进行遗传标记的方法将无法追踪病毒进入细胞核内的过程。腺病毒的核心蛋白一直伴随病毒感染的整个过程，因此研究腺病毒核心蛋白的遗传标记无疑具有重要的意义。本研究在基因组水平对腺病毒核心蛋白（如pVII）进行荧光遗传标记，由此建立一种新的腺病毒遗传标记方法。然后在此基础上，将所建立的新方法分别用于knob修饰的腺病毒体外感染过程及条件复制型溶瘤腺病毒在动物体内肿瘤中的示踪研究。目前有关腺病毒核心蛋白遗传标记方法及其相关研究还未见有报道，因此本研究具有明显的创新性。

结项摘要

腺病毒的标记方法大概分为两大类即化学标记与遗传标记，对研究腺病毒感染机制及动物体内腺病毒的追踪过程具有非常重要的意义。同化学标记方法相比较，遗传标记具有标记效率高及标记后病毒活力高等明显的优点。目前腺病毒的遗传标记主要是采用对腺病毒衣壳蛋白进行遗传标记。在病毒感染细胞后，所标记的衣壳蛋白将会脱落，因此对腺病毒衣壳蛋白进行遗传标记的方法无法追踪病毒进入细胞核内的过程。腺病毒的核心蛋白一直伴随病毒感染的过程，因此研究腺病毒核心蛋白的遗传标记无疑具有重要意义。. 本项目在基因组水平对腺病毒核心蛋白进行荧光遗传标记，主要完成了以下科研内容：1.成功构建了荧光蛋白标记腺病毒蛋白穿梭载体；2.成功构建了荧光蛋白标记腺病毒蛋白腺病毒载体；3.成功制备和纯化了多种将荧光蛋白标记衣壳蛋白pIX或核心蛋白pVII的病毒颗粒；4.进行了荧光蛋白标记腺病毒颗粒的相应体内、外实验研究。项目执行期间，发表SCI文章12篇，SCIE文章1篇，核心文章9篇，重要文章13篇。申请专利9项，获得授权专利6项。培养在读博士生8名，在读硕士研究生17名，培养毕业博士后2名，毕业博士生4人，毕业硕士研究生13人。课题通过采用蓝白斑筛选的方法在腺病毒载体基因组的同源重组区域引入单一酶切位点，从而提高同源重组的效率，进而加速了人们对腺病毒衣壳蛋白pIX或核心蛋白pVII进行荧光蛋白标记的腺病毒载体的构建，具有明显的特色和创新性。同时，国内外目前缺乏有关在基因水平对腺病毒载体的核心蛋白进行遗传标记的研究报道，通过本项目的研究，为knob修饰腺病毒感染机制的基础研究及溶瘤腺病毒在临床治疗安全性研究提供了条件及理论依据，具有重大的理论意义和实际应用价值。

项目成果

期刊论文数量（35）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
红色荧光蛋白遗传标记腺病毒衣壳蛋白pⅨ的实验研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    陕西师范大学学报(自然科学版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵俊丽;王东阳;南天惠;王丽娴;廖晓玉;夏海滨
  • 通讯作者：
    夏海滨
Apoptosis induced by PGC-1 beta in breast cancer cells is mediated by the mTOR pathway
PGC-1β在乳腺癌细胞中诱导的细胞凋亡是由mTOR通路介导的
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Oncology Reports
  • 影响因子：
    4.2
  • 作者：
    Xia, Haibin;Liu, Qilun;Li, Fang;Qiu, Jing;Fan, Heng;Ma, Haibin;Zhu, Yongzhao;Wu, Ligang;Han, Xuebo
  • 通讯作者：
    Han, Xuebo
转录激活因子样效应物核酸酶
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    生命的化学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    孟文鹏;夏海滨
  • 通讯作者：
    夏海滨
A rapid generation of adenovirus vector with a genetic modification in hexon protein
快速生成六邻体蛋白基因修饰的腺病毒载体。
  • DOI：
    10.1016/j.jbiotec.2011.12.022
  • 发表时间：
    2012-02-10
  • 期刊：
    JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
  • 影响因子：
    4.1
  • 作者：
    Di, Bingyan;Mao, Qinwen;Xia, Haibin
  • 通讯作者：
    Xia, Haibin
A novel system for rapid screening of effective siRNA target sites by one step transfection with a single vector.
一种通过单一载体一步转染快速筛选有效 siRNA 靶位点的新型系统。
  • DOI：
    10.1016/j.jbiotec.2011.05.004
  • 发表时间：
    2011-09
  • 期刊：
    Journal of biotechnology
  • 影响因子：
    4.1
  • 作者：
  • 通讯作者：

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其他文献

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    --
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  • 通讯作者：
    夏海滨
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  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
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    夏海滨
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其他文献

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AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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