基于IL-1α调节支持细胞紧密连接通透性研究五子衍宗丸生精机理

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81473690
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H3109.中医外科学
  • 结题年份:
    2018
  • 批准年份:
    2014
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2015-01-01 至2018-12-31

项目摘要

The timely restructuring of tight junction (TJ)is known to play an important role in spermatogenesis. Interleukin(IL)-1α,which is the cytokine secreted by sertoli cell, is shown to "open" TJ permeability barrier. Wuziyanzong pill is a classical formula in the treatment of male infertility. The mechanism of Wuziyanzong pill is under further study. The preliminary studies showed that IL-1αlevel increased significantly in Cox7a2 recombint plasmid group. Moreover, the claudin-11 expression in kidney essence deficiency rat testis decreased greatly following Wuziyanzong pill treatment. Regarding the TJ permeability barrier as the breakthrough point and relationship of "Cox7a2-IL-1α- TJ permeability -spermatogenesis", it is hypothesized that the improvement of spermatogenesis by Wuziyanzong pill be mediated via the action of IL-1αon TJ permeability. In this study, Wuziyanzong pill and its medicated serum is administered to kidney deficiency syndrome rats and primary purified rat sertoli cell respectively. With the method of cell biology, molecular biology and serum pharmacology, the IL-1αlevel, TJ permeability and spermatogenesis are to be observed both in vivo and in vitro. The present study is of great significance in elucidating the spermatogenetic mechanisms by Wuziyanzong pill via TJ permeability.
支持细胞紧密连接通透性的有序调节在精子形成中发挥重要作用,白细胞介素(IL)-1α可增加紧密连接通透性。五子衍宗丸是治疗男性不育经典方,该方是否可调控紧密连接仍待研究。前期实验表明Cox7a2重组质粒转染支持细胞后IL-1α水平升高,五子衍宗丸干预肾虚精亏证大鼠后紧密连接蛋白claudin-11表达下降。本课题以"IL-1α调节紧密连接通透性"为切入点,依据"Cox7a2-IL-1α-紧密连接-生精功能" 密切关联为理论基础,提出"五子衍宗丸通过IL-1α途径调节紧密连接通透性,进而改善生精功能"假说。本研究采用五子衍宗丸对肾精亏虚证生精障碍大鼠、原代培养大鼠支持细胞进行干预,通过细胞、分子生物学和血清药理学等方法观察IL-1α、紧密连接通透性及生精功能变化,对从支持细胞"紧密连接通透性调控"途径揭示五子衍宗丸改善生精功能机理具有重要意义。

结项摘要

五子衍宗丸是中医治疗男性不育的代表方。该法如何通过调控紧密连接通透性进而改善生精功能还所知甚少。我们通过离体和在体实验观察了五子衍宗丸干预后支持细胞分泌的炎症因子水平、紧密连接通透性及超微结构、组成蛋白表达及生精功能变化。研究显示:(1)离体实验:大鼠原代支持细胞:和正常细胞相比,转染cox7a2重组质粒后支持细胞紧密连接组成蛋白(JAM-A、ZO-1)表达下降,紧密连接结构松散,而五子衍宗丸含药血清干预后紧密连接组成蛋白(JAM-A、ZO-1)表达升高,紧密连接结构恢复正常。小鼠原代支持细胞:与正常细胞相比,采用Cox7a2过表达和Cox7a2-siRNA敲降对支持细胞炎症因子无明显影响。Cox7a2-siRNA转染支持细胞后紧密连接组成蛋白(JAM-A、ZO-1)表达升高。TNFa可降低紧密连接组成蛋白(Claudin-5、Claudin-11、Occludin)表达。五子衍宗丸含药血清干预后紧密连接组成蛋白(JAM-A、Occludin)表达有升高趋势。(2)在体实验:通过构建肾精亏虚证生精障碍小鼠发现:睾丸内各炎症因子水平(IL-1α、IL-6、IL-17和TNFα)均显著升高,紧密连接完整性和超微结构受损,组成蛋白表达无显著变化。五子衍宗丸干预后,睾丸内炎症因子水平显著下降,损伤的紧密连接完整性及超微结构得以恢复。本研究揭示了五子衍宗丸改善生精功能机理与其调控睾丸内炎症因子水平及紧密连接通透性有关。

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
五子衍宗丸含药血清对小鼠睾丸支持细胞分泌功能及自噬的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
    中华中医药杂志
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    崔天薇;刘保兴;秦茂;张秀平;高云霄
  • 通讯作者:
    高云霄

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其他文献

五子衍宗丸含药血清对大鼠睾丸支持细胞分泌产物的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    中华中医药杂志
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    张圣强;刘保兴;王鑫;李兰群;张秀平;张铁;徐亚平
  • 通讯作者:
    徐亚平
五子衍宗丸含药血清对大鼠睾丸支持细胞活力的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    北京中医药大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    张圣强;刘保兴;王鑫;李兰群;张秀平;张铁;徐亚平
  • 通讯作者:
    徐亚平
五子衍宗丸对肾虚精亏证大鼠细胞色素C氧化酶7a2及细胞外信号调节激酶磷酸化水平表达的影响
  • DOI:
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  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
    北京中医药大学学报
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  • 作者:
    张秀平;刘保兴;秦茂;崔天薇
  • 通讯作者:
    崔天薇

其他文献

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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