黄瓜花叶病毒2a复制酶与豆科植物抗病蛋白RT4-4在过敏反应中的互作分子机制研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30900936
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    陶小荣
  • 依托单位：
    南京农业大学
  • 学科分类：
    C1401.植物病理学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

研究抗病蛋白与Avr蛋白的互作是了解病原物如何被抗病蛋白所识别并进而诱导抗病反应的重要途径，本项目拟在原有黄瓜花叶病毒（CMV）诱导豆科植物发生过敏反应（HR）的基础之上，开展CMV 2a复制酶与菜豆抗病蛋白RT4-4的互作分子机制研究，明确RT4-4与2a复制酶是一种直接的还是间接的互作，鉴定直接互作中RT4-4与2a复制酶的互作结构域，或筛选间接互作中2a复制酶诱导HR反应的寄主靶蛋白，了解RT4-4分子内结构域互作及其在识别2a蛋白中作用，明确RT4-4与2a复制酶的细胞定位，鉴定其是否必需进入细胞核才能诱导HR反应。项目的完成可望较全面的反映RT4-4与CMV 2a复制酶的互作分子机理，为CMV诱导豆科植物过敏反应的机制提供理论基础，同时验证当前抗病蛋白与Avr蛋白互作工作模式的合理性及该工作模式是否具有普适性，对于进一步认识抗病蛋白与Avr蛋白的互作机制有着重要的科学意义。

结项摘要

黄瓜花叶病毒(CMV)可以在豆科植物上诱导局部的过敏反应（HR），之前通过CMV侵染性克隆交换研究表明CMV 2a蛋白对于在豆科植物上诱导HR具有重要作用。本课题的的通过植物表达载体单独表达CMV编码的所有蛋白，发现只有2a复制酶蛋白能够诱导豇豆产生HR，而CMV编码的其他蛋白则不能诱导HR反应。将2a进行单位点F631突变成Y就不再诱导坏死反应，而把2a另一个位点A641突变成S后却仍然可以诱导过敏反应；同时将两个位点突变后F631Y&A641S，则不再诱导豇豆产生HR；此外，我们发现三个突变体的复制能力和野生型相当。将2a蛋白与复制相关高度保守的GDD区域610位点D突变成A后， D610A突变体丧失了复制酶活性，但是，该突变体依然可以在豇豆上诱导产生HR。将GDD突变体进行缺失突变：2a301-778aa依然具有GDD突变体诱导HR的活力。我们的研究表明CMV2a蛋白单独就足以在豇豆上诱导HR，但这一功能与2a的复制酶活性是独立平行的。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
农杆菌介导的CMV侵染性克隆及2b缺失突变体构建
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    姚敏;张天奇;田志超;王源超;陶小荣
  • 通讯作者：
    陶小荣
Repetitive prime-and-realign mechanism converts short capped RNA leaders into longer ones that may be more suitable for elongation during rice stripe virus transcription initiation
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  • DOI：
    10.1099/vir.0.033902-0
  • 发表时间：
    2012-01-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY
  • 影响因子：
    3.8
  • 作者：
    Yao, Min;Zhang, Tianqi;Tao, Xiaorong
  • 通讯作者：
    Tao, Xiaorong
Complete genome sequence of a tomato spotted wilt virus isolate from China and comparison to other TSWV isolates of different geographic origin
中国番茄斑萎病毒分离株的全基因组序列及与其他不同地理来源的 TSWV 分离株的比较
  • DOI：
    10.1007/s00705-011-1078-9
  • 发表时间：
    2011-10-01
  • 期刊：
    ARCHIVES OF VIROLOGY
  • 影响因子：
    2.7
  • 作者：
    Hu, Zhong-Ze;Feng, Zhi-Ke;Tao, Xiao-Rong
  • 通讯作者：
    Tao, Xiao-Rong

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  • 通讯作者：
    陶小荣

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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