E3(泛素连接酶)参与植物响应低磷胁迫的分子机制

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    31070244
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    35.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C0206.植物激素与生长调节物质
  • 结题年份:
    2013
  • 批准年份:
    2010
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

磷是植物必需的大量元素之一,但土壤中磷浓度极低,一般低于10 uM,因此植物经常遭受低磷胁迫。我们已有的研究表明在正常条件下拟南芥中WRKY6抑制PHO1基因的表达,在磷胁迫时,WRKY6蛋白被降解从而解除对PHO1基因表达的抑制。使植物更好适应低磷胁迫。利用酵母双杂交技术筛选得到一个与WRKY6互作的E3(泛素连接酶)。构建E3基因的过量表达材料和敲除突变体后,首先在低磷胁迫条件下进行性状检测,发现E3基因过量表达材料表现较野生型耐低磷的表型;进一步的实验证明在E3基因过量表达材料中PHO1基因表达量较野生型高,而在E3基因敲除突变体中PHO1基因的表达量较野生型降低,推测E3基因可能参与WRKY6调控PHO1基因表达的这条通路中。后继实验还在进行中。

结项摘要

成功克隆拟南芥中的一个E3基因,通过转基因实验证明2个E3过量表达材料比野生型和突变体更加耐受低磷胁迫。Northern blot实验证明该基因受到低磷胁迫的诱导表达。利用Co-IP(免疫共沉淀)和BiFC(双分子荧光互补)技术,检测E3蛋白和WRKY6蛋白不互作。进行低磷(10uM)处理3天后的野生型、WRKY6过量表达和敲出突变体根部和叶片的总蛋白荧光差异凝胶电泳实验,其中发现有5个E3蛋白的表达量有变化,通过荧光实时定量PCR技术检测有3个基因受到低磷胁迫的诱导表达。

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
烟草WRKY12分离、表达与多克隆抗体制备
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
    核农学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    李立芹
  • 通讯作者:
    李立芹
农作物Pht1家族磷转运体蛋白的生物信息学分析
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
    作物杂志
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    李立芹
  • 通讯作者:
    李立芹
番茄美粉1号子叶再生体系建立
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
    江苏农业科学
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    李立芹
  • 通讯作者:
    李立芹

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其他文献

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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