高尔基体在卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的动态变化、功能及其与卵子质量的关系研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81300480
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    23.0万
  • 负责人：
    陈磊
  • 依托单位：
    郑州大学
  • 学科分类：
    H0413.卵母细胞发育、成熟、受精及其异常
  • 结题年份：
    2016
  • 批准年份：
    2013
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2014-01-01 至2016-12-31

项目摘要

Defects of oocytes derived from abnormal meiotic maturation and low oocyte quality are leading causes for aberration of early embryonic development and the failure of assisted reproductive technology. In this project, the subcellular dynamic localization of Golgi apparatus and Golgi-specific proteins will be studied using fluorescent probes, immunofluorescent staining, and time-lapse live cell imaging system. Employing RNA interference technology, the functions of two Golgi-specific proteins, TGN38 and golgin 97, in oocyte meiotic maturation and early embryonic development will be investigated. Further research will reveal the molecular mechanisms and signal transduction pathways involved in the roles of TGN38 and golgin 97. The aberration of localization and expression levels of TGN38 and golgin 97 in both mouse and human oocytes will be examined to uncover the relationship between oocyte aging, embryo developmental potential and Golgi apparatus aberration. The results will help to develop new method for oocyte quality evaluation and thus the improvement of assisted reproductive technology.
卵母细胞减数分裂成熟异常导致的卵子缺陷及卵子老化导致的卵子质量下降是引起胚胎发育异常和辅助生殖技术助孕失败的重要因素。本项目将利用高尔基体荧光探针及活细胞激光共聚焦实时观察技术研究高尔基体及其特异蛋白在卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育过程中的动态变化，并探讨高尔基体在卵母细胞中的分布模式与胚胎发育能力之间的关系。通过RNA干扰的方法研究高尔基体特异蛋白TGN38及golgin97在上述过程中的作用，并初步阐明这些蛋白发挥作用的机制及信号通路。利用小鼠卵子老化模型及高龄妇女的未成熟卵母细胞，研究TGN38及golgin97在老化卵子中定位和表达水平的异常变化及其与胚胎发育之间的关系，初步阐明老化卵子质量下降与高尔基体异常的相关性。本项目的研究结果将有助于建立卵子质量评价新方法，提高辅助生殖的成功率。

结项摘要

高尔基体是真核生物细胞内普遍存在的、重要的膜状细胞器，它的主要功能是对蛋白质和脂类进行修饰和转运。同时，研究也发现高尔基体在细胞极性的建立以及调节细胞周期方面也有重要作用在真核生物的体细胞中，高尔基体与中心体有密切的联系，这可能与细胞内蛋白的定向运输以及中心体的定位有关。高尔基体的标志蛋白反面膜整合蛋白TGN38的功能目前研究很少。在本课题中，我们主要研究了TGN38在小鼠卵母细胞体外成熟过程中的表达、定位和功能。TGN38在小鼠卵母细胞从GV期发育到MII期的过程中均有表达。在GV期，TGN38定位在卵母细胞的细胞质中，在MI期和MII期，TGN38在纺锤体的两极聚集，并且与γ-tubulin共定位。用纺锤体微管干扰剂nocodazle或taxol处理卵母细胞不影响TGN38与γ-tubulin的共定位。利用RNA干扰的方法使卵母细胞内TGN38的表达水平降低，发现卵母细胞阻滞在MI期的比率上升，同时排出极体的比率下降，并且被阻滞在MI期的卵母细胞中纺锤体组装检验点被激活。进一步的研究发现，在排出极体的卵母细胞中，TGN38表达水平降低的细胞发生均等分裂的比率升高。另外，在TGN38表达降低的卵母细胞中，纺锤体向卵母细胞边缘的迁移不能正常进行，微丝帽的形成也受到影响。我们的结果提示TGN38可能参与小鼠卵母细胞的中/后期转换和不对称分裂，进一步揭示了高尔基体在卵子成熟过程中可能发挥的重要作用。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Influence of endometrial thickness on treatment outcomes following in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection.
子宫内膜厚度对体外受精/胞浆内单精子注射后治疗结果的影响。
  • DOI：
    10.1186/s12958-016-0222-5
  • 发表时间：
    2017-01-05
  • 期刊：
    Reproductive biology and endocrinology : RB&E
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Ma NZ;Chen L;Dai W;Bu ZQ;Hu LL;Sun YP
  • 通讯作者：
    Sun YP

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其他文献

基于垂直构造梯度优化的全波形反演方法
  • DOI：
    10.6038/cjg2022p0179
  • 发表时间：
    2022
  • 期刊：
    地球物理学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张灵莉;任玉晓;刘斌;王凯;许新骥;陈磊
  • 通讯作者：
    陈磊
Surface/interface engineering N-doped carbon/NiS2 nanosheets for efficient electrocatalytic H2O splitting
用于高效电催化 H2O 分解的表面/界面工程 N 掺杂碳/NiS2 纳米片
  • DOI：
    10.1039/c9nr10173j
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    Nanoscale
  • 影响因子：
    6.7
  • 作者：
    张德亮;牟红宇;陈磊;高星;王德宝;宋彩霞
  • 通讯作者：
    宋彩霞
CRISPR/Cas9系统及其在单子叶植物中的应用
  • DOI：
    10.15889/j.issn.1002-1302.2017.18.005
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    江苏农业科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    徐继法;徐艳;赵吉强;陈磊;郭善利;宋建成
  • 通讯作者：
    宋建成
人工小RNA调控元件在合成生物学中的应用
  • DOI：
    10.13345/j.cjb.220068
  • 发表时间：
    2022
  • 期刊：
    生物工程学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张芬芳;孙韬;陈磊;张卫文
  • 通讯作者：
    张卫文
放射性空间V型桥墩节点竖向承载性能研究
  • DOI：
    10.19701/j.jzjg.2020.22.022
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    建筑结构
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    段德章;陈磊;潘建荣;王湛;王鹏
  • 通讯作者：
    王鹏

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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