引导脂肪干细胞构建组织工程角膜基质样细胞片的研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81060076
  • 项目类别：
    地区科学基金项目
  • 资助金额：
    25.0万
  • 负责人：
    李霞
  • 依托单位：
    广西医科大学
  • 学科分类：
    H1301.角膜及眼表疾病
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

角膜病是第二大致盲性眼病，异体角膜移植是其唯一有效的治疗方法，但存在供体严重缺乏、术后发生免疫排斥反应等问题。以自体来源的干细胞构建组织工程角膜可解决供体材料缺乏和免疫排斥的两个关键问题。我们在前期研究工作中成功从人脂肪组织中分离培养了脂肪干细胞；并发现以压缩胶原为支架的三维培养系统可以使脂肪干细胞与支架复合体形成符合角膜基质结构特点的多层平行胶原薄板结构。在此基础上，本项目拟以脂肪干细胞为种子细胞，利用前期研究中开发的三维培养系统，结合不同诱导体系，探索诱导自体脂肪干细胞向角膜基质细胞分化的体外培养条件，以期构建出在形态结构、基因表达、细胞外基质表达等各个方面与角膜基质符合的组织工程角膜基质细胞片。为探索自体干细胞构建组织工程角膜的临床应用奠定基础。

结项摘要

利用体外三维培养模型探讨角膜基质病理生理过程近年来偶有报道。至今尚无利用人成体干细胞以体外三维培养体系诱导构建组织工程角膜基质的报道。本研究中，我们将人脂肪干细胞（Adipose-Derived Stem Cells, ADSCs）作为种子细胞，以压缩胶原为支架，形成细胞片，然后进行体外培养诱导，发现Advance培养基配合bFGF及VitC可以诱导ADSCs采纳角膜基质细胞表型。针对该培养体系，我们应用免疫荧光法在共聚焦显微镜下对细胞片进行形态学检测，发现细胞片内形成类似角膜基质样的多层平行细胞结构，ADSCs扁平生长于其中。我们利用Real-time PCR的方法动态检测到该细胞片表达角膜基质细胞功能学相关基因Keratocan、CHST6及B3GnT7明显升高。对于细胞外基质（Extracellular Matrix, ECM）的分析，Western Blot动态检测到细胞片中有角膜基质特有蛋白聚糖Keratocan的表达，间接免疫荧光法检测到Keratocan及硫酸角质素（Keratan Sulfate, KS）表达于细胞片内。该体外三维培养体系可以构建与人角膜基质在形态、结构、基因表达及ECM表达上类似的组织工程角膜基质细胞片。

项目成果

期刊论文数量（8）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
琼脂糖覆盖法构建体外三维培养角膜基质细胞模型的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2010
  • 期刊：
    广西医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李霞;谭少健;李杰;周卫为;黄宝宇
  • 通讯作者：
    黄宝宇
牛角膜基质细胞的两步酶消化法高效分离及体外培养观察
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    中华实验眼科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李杰;李霞;谭少健;黄宝宇;周卫为;陈迎迎
  • 通讯作者：
    陈迎迎
应用超声生物显微镜观察Bigbag人工晶状体在高度近视眼囊袋内的稳定性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    眼科新进展
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    唐东永;李霞;梁皓;何剑;谭少健
  • 通讯作者：
    谭少健
三维培养与角膜组织工程学
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    微创医学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李霞;谭少健
  • 通讯作者：
    谭少健
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  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国实用眼科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘彩娟;梁皓;谭少健;李霞
  • 通讯作者：
    李霞

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其他文献

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  • 通讯作者：
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  • 通讯作者：
    李霞

其他文献

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TGF-β3对角膜基质体外三维培养模型中纤维化细胞外基质合成的影响
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    2013
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  • 项目类别：
    地区科学基金项目

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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