应用H295R细胞研究SF-1、ACTHR对肾上腺皮质激素分泌调控的影响机制

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81200579
项目类别：
青年科学基金项目
资助金额：
23.0万
负责人：
胡东亮
依托单位：
武汉大学
学科分类：
H0704.肾上腺及相关疾病
结题年份：
2015
批准年份：
2012
项目状态：
已结题
起止时间：
2013-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
丁协刚；张林；刘清亮；曹锐；赵战魁；曹远飞；
关键词：
类固醇生成因子-1 ACTHR 肾上腺肿瘤 H295R细胞

项目摘要

Adrenal diseases often cause body harm in the form of hormone disorders or solid tumor mass. It is more common in clinical practice. The applicant of this subject found that the expression of steroidogenic factor-1(SF-1) in adrenal tumor was elevated in compared with normal adrenal, and SF-1 altered adrenocortical hormone sensitivity to some regulatory factors. Recent studies have shown that ACTH played an important role in SF-1 and adrenal disease via combining to its receptor ACTHR. The role of ACTHR was wider than traditional understanding. Based on these findings, this application will investigate the effect of different SF-1 and ACTHR expression on adrenocortical hormone secretion and regulation using human adrenocortical carcinoma H295R cells, as well as ACTHR on common adrenal tumor. To reveal the influence of SF-1 and ACTHR on adrenal tumorigenesis and hormone secretion so as to further clarify its pathogenesis and provide a theoretical basis for the treatment of common adrenal disease.

肾上腺疾病常以激素分泌紊乱或实体肿瘤占位的形式对机体造成损害，在临床上较为常见。本课题申请人前期研究发现，与正常肾上腺相比，肾上腺肿瘤中类固醇生成因子-1（SF-1）表达升高，且SF-1影响肾上腺皮质激素对部分调控因素的敏感性。近期研究显示，ACTH通过与其受体ACTHR结合后，对SF-1和肾上腺疾病的致病发挥重要角色，ACTHR的作用远比传统认识更为广泛。以上述发现为基础，本课题应用人肾上腺皮质癌H295R细胞，研究SF-1、ACTHR不同表达水平对肾上腺皮质激素分泌和调控的影响，同时研究ACTHR在常见肾上腺肿瘤中的作用，揭示SF-1、ACTHR对肾上腺肿瘤成瘤机制及激素分泌调控的影响，进一步阐明其致病机理，为常见肾上腺疾病的治疗提供理论依据。

结项摘要

我们前期研究了类固醇生成因子-1（SF-1）在常见肾上腺疾病中的发病机理。近来文献显示，促肾上腺皮质激素（ACTH）通过与其受体ACTHR结合后，对SF-1以及肾上腺疾病的致病发挥重要角色，ACTHR的作用远比传统认识更为广泛。为此，本课题在应用人肾上腺皮质癌H295R细胞的基础上，拟进一步阐明SF-1、ACTHR对肾上腺皮质激素分泌调控及肿瘤形成的致病机制。首先，检测ACTHR在醛固酮瘤、皮质醇瘤及无功能肾上腺瘤中的表达水平，结果发现醛固酮瘤组ACTHR表达最高，而无功能腺瘤和皮质醇瘤中ACTHR表达水平低于正常肾上腺；ACTHR高表达后细胞增殖活性呈双重变化趋势，即先升高后降低，在第二天达到增殖高峰，而TUNEL结果显示两组细胞的凋亡无明显差异性，这显示ACTHR在不同类型肾上腺肿瘤中表达水平不同，其致病机制可能与肿瘤细胞病理类型及激素分泌情况有关，且增殖效应强于凋亡效应。其次，进一步了解ACTHR对肾上腺皮质激素分泌的影响并探寻关键信号通道蛋白。结果显示ACTHR高表达可以增加H295R细胞对血管紧张素2和钾离子刺激的敏感性， ACTH主要通过cAMP/PKA信号通道对皮质醇分泌发挥重要作用，但对刺激醛固酮激素分泌具有一定时限性，可能还有其他因素或信号通道参与。最后，通过RNA干扰抑制SF-1表达，了解其在醛固酮和皮质醇激素急慢性分泌时相中的作用，结果显示SF-1表达下调可以降低醛固酮和皮质醇对ACTH的敏感性和反应性。结合前期研究成果，本课题揭示了ACTHR在不同肾上腺肿瘤中其表达水平和致病机理可能不同，而ACTHR和SF-1可以通过信号通道或急慢性分泌时相等因素影响醛固酮和皮质醇激素分泌的敏感性，这为下一步深入认识及治疗肾上腺疾病提供了实验依据。