雷公藤内酯醇诱导骨髓瘤细胞凋亡靶蛋白的筛选及其分子机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
30971282
项目类别：
面上项目
资助金额：
31.0万
负责人：
金洁
依托单位：
浙江大学
学科分类：
H0810.淋巴瘤与淋巴细胞疾病
结题年份：
2012
批准年份：
2009
项目状态：
已结题
起止时间：
2010-01-01 至2012-12-31

项目参与者：
杨敏；娄引军；沈佳坤；马丽亚；王云贵；马秋玲；郑江；
关键词：
多发性骨髓瘤耐药逆转靶蛋白雷公藤内酯醇

项目摘要

我们在国际上首先发现雷公藤内酯醇（TPL）能诱导多发性骨髓瘤（MM）细胞株和患者原代细胞凋亡，对正常细胞几无影响。进一步研究发现TPL对地塞米松耐药的MM 细胞株（MM.1R）同样有效，研究发现TPL通过抑制NF－κB核转位和抑制PI3K/Akt途径发挥作用。提示NF－κB、PI3K/Akt途径有可能是TPL的作用靶点。更有意义的是，TPL能增加MM.1R的糖皮质激素受体（GR）的表达，并且该效应不被IL-6抑制，表明TPL是一极具潜力的新型抗MM及耐药MM的药物，但是其作用的直接靶点是什么？该靶点在逆转耐药骨髓瘤中发挥怎样的作用目前还不清楚。本课题以TPL为基本结构，应用药物化学方法合成新的衍生物并进行靶蛋白的筛选；2D电泳质谱分析蛋白序列测定确定靶蛋白；并检测靶蛋白在MM及耐药MM中的作用。通过这个关键靶点，将可设计更多小分子药物，提供具有我国自主知识产权的抗MM靶向药物，具有重要意义

结项摘要

本课题以雷公藤（TPL）为基本结构，应用药物化学方法合成新的衍生物雷公酮，后者与骨髓瘤细胞作用前后的细胞制备的匀浆以及细胞匀浆与TPL作用，经双向电泳与质谱分析探寻TPL直接作用的靶蛋白。结果电泳显示靶蛋白条带较多，需要进一步洗脱或改变雷公酮的浓度。此时，我们发现美国人Titov在natrue Chemical Biology杂志上发表了寻找到雷公藤的靶蛋白是XBP。因此，继续做这部分研究已经没有意义了。因此，我们按照标书的后一部分内容，研究了TPL克服耐药的机制。我们发现，TPL能增加耐药骨髓瘤的糖皮质激素受体，从而增加耐药细胞对激素的敏感性，该结果不被骨髓瘤最重要的调控因子-白介素6的阻断。进一步发现TPL与地塞米松联合使用能增加对骨髓瘤细胞的生长抑制作用，促进细胞凋亡。同时发现TPL能下调microRNA142-5p与181a的表达，后两种微小RNA能抑制糖皮质激素受体的表达，因此，我们得出，TPL是通过下调微小RNA142-5p与microRNA181a的表达，进而促进骨髓瘤细胞糖皮质激素受体的表达，改变耐药细胞对激素的耐药，从而提高杀伤骨髓瘤细胞的效果。microRNA142-5p与microRNA181a可能就是TPL的作用靶点或作用靶点之一。为骨髓瘤的治疗可能提供了新的方法。.课题组共发表SCI论文2篇，培养了1名博士研究生与1名博士后。在本课题的资助下，作为“多发性骨髓瘤耐药机制及新疗法的应用研究”成果的主要内容，课题组获得了2012年浙江省科技进步二等奖。