稻瘟病菌cAMP-PKA信号途径下游基因调控网络及其功能研究

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基本信息

  • 批准号:
    31370172
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    82.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C0109.病原真菌学与其他微生物
  • 结题年份:
    2017
  • 批准年份:
    2013
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2014-01-01 至2017-12-31

项目摘要

In previous studies, we identified two novel transcriptional regulators MoSom1 and MoCdtf1, which are essential for infection-related morphogenesis and pathogenicity of the rice blast fungus Magnaporthe oryzae. MoSom1 is a homolog of Saccharomyces cerevisiae Flo8. Our experiment results show that MoSom1 functions downstream of cAMP-PKA signaling pathway and physically interacts with MoCdtf1 and MoStu1(an APSES transcriptional factor). Based on these results, this project will investigate the gene regulatory network of downstream from the cAMP-PKA pathway and its roles in regulating infection-related morphogenesis and pathogenicity by this fungus. The following aspects will be involved in the project: (1) Functional analysis of the predicted PKA phosphorylation sites and various splicing isoforms of MoSom1;(2)Biological function of the genes encoding the proteins with LisH domain in Magnaporthe genome and the proteins interacting with MoSom1;(3)Cross talk at the downstream of the two signaling pathways:cAMP-PKA pathway and MAPK pathway;(4)Targeted deletion and functional analysis of several genes regulated by cAMP-PKA pathway. Above research results will further elucidate molecular machanism of M. oryzae cAMP-PKA signaling pathway in fungal morphogenesis and pathogenicity.
在先前的研究中,我们鉴定了2个新的稻瘟病菌转录调控因子MoSom1和MoCdtf1,它们在稻瘟病菌形态分化和致病性中均起关键作用。实验证明,稻瘟病菌MoSom1与酿酒酵母Flo8同源,MoSom1作用于cAMP-PKA信号途径下游,并与MoCdtf1和MoStu1(APSES转录因子)互作。在此基础上,本项目将研究稻瘟病菌cAMP-PKA途径下游的基因网络及其调控该菌形态分化和致病性的分子机制,主要研究内容包括:(1)MoSom1的PKA磷酸化位点、剪切方式对其功能的影响;(2)稻瘟病菌基因组中含LisH结构域蛋白及与MoSom1互作蛋白编码基因的功能;(3)稻瘟病菌cAMP-PKA途径与MAPK途径下游的cross talk网络;(4)受cAMP-PKA途径调控的基因功能。研究结果将进一步阐明稻瘟病菌cAMP-PKA途径调控形态分化和致病性的分子机理,意义重大。

结项摘要

稻瘟病菌MoSom1是一个与酿酒酵母Flo8功能同源的转录调控因子,作用于cAMP-PKA信号途径下游。本项目主要对MoSom1 PKA磷酸化位点、不同剪切体功能、互作蛋白及cAMP-PKA下游调控网络等进行了研究。通过对8个推测的MoSom1 PKA丝/苏氨酸(S/T)磷酸化位点分别进行定点删除突变,以及进一步的氨基酸残基替换突变(将S227突变为A、E、V或Y)和以第227位氨基酸单磷酸化多肽抗体为探针的Western杂交分析,证明了S227是对MoSom1生物学功能起关键作用的PKA磷酸化位点。通过对稻瘟病菌MoSom1的6种不同剪切体(I1~I6)互补△Mosom1突变体的表型分析,发现MoSom1不同剪切体均有正常的生物学功能。稻瘟病菌基因组中除已报道的MoSOM1和TIG1外,还有另外5个含LisH结构域的蛋白编码基因,基因敲除和突变体表型分析的结果表明,敲除MGG_00753基因仅引起菌落色素和致病性的微弱下降,MGG_01665和MGG_04137基因敲除突变体则没有明显表型,而敲除MGG_06742或MGG_09369基因可能是致死的。利用亲和纯化、SAGE表达谱测序和酵母双杂交(Y2H)等方法获得了与MoSom1互作的蛋白Cks1。△cks1突变体营养生长缓慢、菌落色素产生减少、不能产生分生孢子,同时丧失了对大麦和水稻的致病性。另外,阐明了稻瘟病菌转录因子Znf1在调控病菌形态分化和致病性中起重要作用,并通过qRT-PCT、Western杂交、Y2H等方法明确了稻瘟病菌转录调控因子MoSom1和Znf1参与cAMP-PKA和MAPK信号途径的cross talk。上述研究结果进一步阐明了稻瘟病菌MoSom1的作用分子机制,加深了对cAMP-PKA信号途径调控网络的认识。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
The cyclin dependent kinase subunit Cks1 is required for infection-associated development of the rice blast fungus Magnaporthe oryzae
细胞周期蛋白依赖性激酶亚基 Cks1 是稻瘟病菌 Magnaporthe oryzae 感染相关发育所必需的
  • DOI:
    10.1111/1462-2920.13796
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
    ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY
  • 影响因子:
    5.1
  • 作者:
    Yue Xiaofeng;Que Yawei;Deng Shuzhen;Xu Lin;Oses-Ruiz Miriam;Talbot Nicholas J.;Peng Youliang;Wang Zhengyi
  • 通讯作者:
    Wang Zhengyi
ZNF1 Encodes a Putative C2H2 Zinc-Finger Protein Essential for Appressorium Differentiation by the Rice Blast Fungus Magnaporthe oryzae.
ZNF1 编码一种推定的 C2H2 锌指蛋白,该蛋白对于稻瘟病菌 Magnaporthe oryzae 的附着胞分化至关重要。
  • DOI:
    10.1094/mpmi-09-15-0201-r
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
    Mol Plant Microbe Interact
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Yue Xiaofeng;Que Yawei;Xu Lin;Deng Shuzhen;Peng Youliang;Talbot Nicholas J;Wang Zhengyi
  • 通讯作者:
    Wang Zhengyi
基于RNA-Seq的稻瘟病菌Δznf1突变体的表达谱分析
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
    中国农业科学
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    岳晓凤;阙亚伟;王政逸
  • 通讯作者:
    王政逸
Identification and characterization of the peroxin 1 gene MoPEX1 required for infection-related morphogenesis and pathogenicity in Magnaporthe oryzae.
稻瘟病菌感染相关形态发生和致病性所需的过氧化物酶 1 基因 MoPEX1 的鉴定和表征
  • DOI:
    10.1038/srep36292
  • 发表时间:
    2016-11-08
  • 期刊:
    Scientific reports
  • 影响因子:
    4.6
  • 作者:
    Deng S;Gu Z;Yang N;Li L;Yue X;Que Y;Sun G;Wang Z;Wang J
  • 通讯作者:
    Wang J
The putative Gγ subunit gene MGG1 is required for conidiation, appressorium formation, mating and pathogenicity in Magnaporthe oryzae
假定的 G γ 亚基基因 MGG1 是稻瘟病菌分生孢子、附着胞形成、交配和致病性所必需的
  • DOI:
    10.1007/s00294-015-0490-1
  • 发表时间:
    2015-11-01
  • 期刊:
    CURRENT GENETICS
  • 影响因子:
    2.5
  • 作者:
    Li, Ya;Que, Yawei;Wang, Zhengyi
  • 通讯作者:
    Wang, Zhengyi

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  • 发表时间:
    --
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    3
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  • 通讯作者:
    王政逸
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  • DOI:
    --
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    汤帅;徐喆;吕务云;童琪;肖宇;王政逸
  • 通讯作者:
    王政逸

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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