黄嘌呤氧化酶与高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风的关系研究

Avian gout, also known as urate deposition, is the most common disease in poultry. Among over twenty reported factors inducing gout, the high calcium diet and nephrotrophic strains of infectious bronchitis virus received most attention. But the pathogenesis of gout induced by these two factors are still unclear. In addition, xanthine oxidase (XOD) has been shown to be related to animal uric acid metabolism and free radicals. Therefore, the aim of the present study is to reveal the relationship between XOD and chicken gout induced by high calcium diet and nephrotrophic strains of infectious bronchitis virus, and its subsequent manifestations, such as hyperuricemia, free radical and renal injury. To achieve this purpose, techniques like in situ hybridization, Real-time PCR, Western blotting, immunohistochemistry, computer image analysis and clinical pathology detection will be employed in this study. We will further bring forward a comprehensive prevention and control measure based on this mechanism study. Furthermore, this study will solve the industrial problem and contribute knowledge to the poultry science and uric acid metabolism disorder in human.

禽痛风又称尿酸盐沉积症，是家禽常见多发病。引起禽痛风的原因达20余种，其中高钙日粮和肾型传支病毒是我国目前生产上鸡发生痛风的两大常见原因，但高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风的发病机制并不清楚。黃嘌呤氧化酶（XOD）与动物机体尿酸代谢和自由基产生有密切关系。因此，本研究利用原位杂交、荧光定量PCR、Western blotting、免疫组化、计算机图像分析技术和临床病理学等检测技术，研究XOD与高钙日粮和肾型传支病毒所致痛风鸡高尿酸血症的相关性，以及XOD和自由基与高钙日粮和肾型传支病毒所致痛风鸡肾损伤的相关性，从而揭示XOD与高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风的关系，进而部分阐明高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风的机理，在此基础上建立综合防治措施，将对养鸡业发展具有重要学术和生产意义。从比较医学上，为人类尿酸代谢紊乱疾病（高尿酸血症）研究提供有价值的借鉴。

痛风又称尿酸盐沉积症，是家禽常见多发病，肾型传支病毒和高钙日粮是鸡发生痛风的两大常见原因，但其发病机制并不清楚。黃嘌呤氧化酶（XOD）与动物机体尿酸代谢有密切关系。本项目系统研究了肾型IBV感染对鸡血液临床病理学、XOD及其相关基因表达的影响；研究了高钙和高钙高蛋白日粮对鸡血液临床病理学、XOD及其相关基因表达的影响；研究制备了鸡源XOD多克隆抗体，并应用于检测鸡组织中XOD蛋白表达情况；研究了肾型IBV感染对鸡肾细胞活性、抗氧化功能、XOD及其相关基因表达的影响；研究了肾型IBV感染对鸡胚生长、血液临床病理学、尿酸代谢、肝肾损伤与其病毒载量之间的关系；并对中药复方对肾型IBV致鸡痛风的防治进行了初步探讨。结果表明，肾型传支病毒和高钙日粮能诱发鸡的高尿酸血症，进而引发痛风，发病过程中，血液临床病理学发生变化，血清XOD活性升高，抗氧化功能降低，肝、肾组织中XOD mRNA表达和蛋白表达增强，相关基因mRNA表达也发生相应变化；肾型传支病毒感染抑制原代鸡肾细胞的增殖，导致细胞XOD活性上升和抗氧化功能下降，XODmRNA基因表达增强，相关基因mRNA表达发生相应的变化；肾型IBV感染鸡胚可致胚体萎缩，肝肾损伤，XOD活性上升，抗氧化功能下降，产生高尿酸血症，尿囊液增多且尿囊液中尿酸排出增加；自配中药复方对肾型传支致鸡痛风有一定的预防和治疗作用。说明，XOD与高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风关系密切；在高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风发病过程中，鸡血清中与尿酸生成密切相关的XOD活性升高，基因表达和蛋白表达增强，从而使得尿酸合成增多进而引起高尿酸血症，这可能是高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风机制之一。总之，通过上述研究，从整体、细胞和分子水平上了解了XOD与高钙日粮和肾型传支病毒致鸡痛风的相互关系，部分阐明了高钙日粮或肾型传支病毒致鸡痛风的机理，也为防治鸡痛风提供了一定的理论基础。

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