利用RNA干扰技术研究帕金森病致病基因Parkin的功能

本课题拟采用最新的分子细胞生物学技术，构建Parkin干扰RNA的质粒载体和腺相关病毒载体，离体研究Parkin基因沉默对多巴胺能细胞存活、突触功能、线粒体功能的影响；筛选并鉴定多巴胺能细胞、GABA能细胞和胶质细胞中当Parkin基因沉默和正常表达时的差异表达蛋白质谱，明确Parkin可能的作用机制和寻找多巴胺能细胞特异的Parkin蛋白底物；利用含有Parkin干扰RNA的腺相关病毒载体建立Parkin knockdown大鼠模型，在体研究其功能缺失对多巴胺能细胞的毒性作用；进一步阐明Parkin在帕金森病发病中的分子作用机制；为寻求新的帕金森病病因治疗靶点提供理论依据；为Parkin基因功能研究和帕金森病发病机制研究提供一种新颖实用的knockdown细胞模型和实验动物模型。