鸡NLRC5受体在宿主先天免疫功能调节中的作用机制及其验证

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31172199
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    60.0万
  • 负责人：
    常国斌
  • 依托单位：
    扬州大学
  • 学科分类：
    C1703.家禽及其他经济动物种质资源与遗传育种学
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

为探求解决当下养殖实际中鸡免疫功能低下和"药残"问题的新途径，本项目拟对鸡NLRC5受体在宿主先天免疫中调节功能以及作用机制进行研究，采用高/低抗性鸡品系（狼山鸡与安卡鸡）全同胞家系为素材，参照家禽先天免疫的发生和调控体系，应用分子克隆、Q-PCR分别检测正常和病原刺激条件下NLRC5受体及其上下游基因的时空表达差异与规律，根据免疫性状表达调控网络的"仿真"原则与通径理论，构建NLRC5受体的信号通路，提出禽类NLRC5受体参与免疫调控的生物学模型，并在细胞水平进一步验证；同时，在阐明NLRC5受体先天免疫信号通路的基础上，利用TOF质谱、单碱基突变技术对影响抗性的候选基因型、单倍型的遗传效应与生理、生化功能分别进行细胞水平和个体水平的鉴定、验证，为禽类的NLRC5受体分子功能及参与先天免疫调控的作用机制提供理论依据，也为抗性新品系的培育以及我国地方鸡优良种质特性的开发、利用提供技术支撑。

结项摘要

为探求解决当下养殖实际中鸡免疫功能低下和"药残"问题的新途径，本项目对鸡NLRC5受体在宿主先天免疫中功能以及作用机制进行研究，应用分子克隆、Q-PCR分别检测正常和病原刺激条件下NLRC5受体及其上下游基因的时空表达差异与规律，成功构建鸡了NLRC5受体参与先天免疫调控的信号通路；同时利用TOF质谱、单碱基突变技术筛选出抗性的候选基因型、单倍型，并探明其遗传效应与生理、生化功能，培育狼山鸡抗性新品系1个。发表论文21篇，SCI收录9篇，申请专利3项，培养博士1名, 硕士4名。主要结果如下： .（1）采用RT-PCR扩增狼山鸡脾脏组织NLRC5的CDS，并通过RACE法扩增3’UTR和5’UTR， 拼接成全长转录本，提交至GeneBank，获得登录号：JQ044414。.（2）利用Q-PCR检测经肠炎和白痢沙门氏菌刺激后的狼山鸡、罗斯鸡和广西黄鸡的肝、脾、盲肠等组织NLRC5受体表达水平，并进行表达谱分析，结合抗性指标和载菌量等表型指标，完成NLRC5受体参与鸡先天免疫的信号通路的构建。.（3）构建NLRC5过表达与ShRNA载体，转染DF1和HD11细胞系，利用Q-PCR检测上下游基因的表达量差异，验证已构建的NLRC5受体信号通路。.(4) 利用MALDI-TOF-MS技术检测对27个国内外鸡种NLRC5受体基因的SNP位点进行大规模筛选，发现37个SNP位点，我国地方鸡种SNP数普遍高于现代商品肉鸡。在狼山鸡NLRC5启动子区域de-1017、-2470处发现A/G单点突变，发现突变性启动子活性显著降低。双荧光素酶系统验证，A/G突变影响启动子活性，受反式作用元件NF-kB、STAT1的调控。.（5）根据基因型筛选AA、GG型狼山鸡半同胞个体各80只，经10 7CFU沙门氏菌刺激后发现，AA 型鸡各项抗性指标均优于GG。AA 型个体NLRC5低表达，而NF-κb信号通路基因高表达，表明NLRC5确实参与先天免疫且通过抑制NF-κb信号通路从而抑制炎症反应。.（6）利用荧光标记微卫星分型技术，通过MHC-Ⅰ（MCW0371）和MHC-Ⅳ（LEI0258）对狼山鸡进行血型判定，发现狼山鸡B21血型个体的免疫性状（H/L比值、IgM、IgG和IFN-γ含量）均优于其他血型。结合-2470处发现A/G突变，在狼山鸡群中进行继代选育，培育出1个高抗狼山鸡新品系。

项目成果

期刊论文数量（29）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（2）
专利数量（0）
Identification of key genes in the response to Salmonella enterica Enteritidis, Salmonella enterica Pullorum, and poly(I:C) in chicken spleen and caecum.
鸡脾和盲肠中对肠炎沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和 Poly(I:C) 反应的关键基因的鉴定
  • DOI：
    10.1155/2014/154946
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    BioMed research international
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Ma T;Chang G;Chen R;Sheng Z;Dai A;Zhai F;Li J;Xia M;Hua D;Xu L;Wang H;Chen J;Liu L;Chen G
  • 通讯作者：
    Chen G
鸡pilRNAs分子的克隆及表达规律分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    马腾;华登科;陈国宏;ZHANG Ying,CHANG Guo-bin*,CHEN Rong,DAI Ai-qin,LUA
  • 通讯作者：
    ZHANG Ying,CHANG Guo-bin*,CHEN Rong,DAI Ai-qin,LUA
斗鸡Nramp1基因多态性与部分免疫指标相关性分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国家禽
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    鲁伟;任立辰;徐琪;陈国宏
  • 通讯作者：
    陈国宏
13个鸡品种NLRC5基因外显子8多态性分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    上海畜牧兽医通讯
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    窦套存;栾德琴;盛中伟;陈国宏
  • 通讯作者：
    陈国宏
Mining the key regulatory genes of chickeninosine 5 #39;-monophosphate metabolism based on time series microarray data
挖掘鸡肌苷5关键调控基因
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    Journal of Animal Science and Biotechnology
  • 影响因子：
    7
  • 作者：
    Jing Chen;Lu Liu;Guobin Chang;Guohong Chen
  • 通讯作者：
    Guohong Chen

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其他文献

不同抗精神分裂症药物对吐鲁番斗鸡攻击行为及皮质酮等激素的影响研究
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    --
  • 作者：
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  • 通讯作者：
    廖和荣
种公鸡弱精子症形成因素的初步研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
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  • 影响因子：
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  • 作者：
    常国斌
  • 通讯作者：
    常国斌
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  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    遗传学报
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    --
  • 作者：
    常国斌;常 洪;刘向萍
  • 通讯作者：
    刘向萍
Cross fertility between the wild Japanese quail in the Weishan Lake area and domestic quail
微山湖地区野生鹌鹑与家养鹌鹑的杂交育性
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  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    《Asian-Aust. J. Anim. Sci.》
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    徐 伟;常洪;常国斌;王惠影
  • 通讯作者：
    王惠影
微山湖野生日本鸣鹑群体遗传共适应的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    《扬州大学学报》农业与生命科学版
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    常国斌;常洪
  • 通讯作者：
    常洪

其他文献

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常国斌的其他基金

PIWI蛋白介导的piRNAs在鸡精子发生中的功能研究
  • 批准号：
    31372297
  • 批准年份：
    2013
  • 资助金额：
    81.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目
新型小分子RNA-禽类piRNAs的遗传特性及发生机理研究
  • 批准号：
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  • 批准年份：
    2007
  • 资助金额：
    16.0 万元
  • 项目类别：
    青年科学基金项目

相似国自然基金

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相似海外基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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