miRNA在人类生物性体液中的法医学鉴定研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81202387
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    23.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H2502.法医物证学及法医人类学
  • 结题年份:
    2015
  • 批准年份:
    2012
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2013-01-01 至2015-12-31

项目摘要

Looking for a sufficiently effective and stable molecular genetics-based methods will show a director for the future human fluid identification in forensic science. microRNA, whose profiling of both conservative and tissue-specific characteristics, should be developed as a marker for the future fluid identification. Our research will take a large number of samples from Chinese Han ethic group as object of study, which including drying marks of forensically relevant biological fluids-blood, semen, saliva, vaginal secretions, and menstrual blood. Meanwhile, improved biological fluids RNA extraction method and miRNA gene chip were used to check the miRNA marker with identification significance. Relevant miRNAs were amplified and examined by RT-PCR technology. Then the data of △Ct values was gathered statistics (intersection between an amplification curve and a threshold line). On the one hand, the △Ct values were used to create two-dimensional (2D) scatter plots to identification of biological fluids, named two-dimensional miRNA body fluid identification assays. On the other hand, the △Ct values were analyzed by the phylogenetic software and phylogenetic trees were constructed by the neighbor-joining (NJ) method, which were used for identification of biological fluids. Combined use above two systems can specifically identify either fluid stain or mixture stain and may provide a promising solution to biological fluids identification for forensic casework.
寻求高效稳定的分子生物学方法对人类生物性体液进行鉴定,是法医物证学的发展方向,而miRNA具有保守性和组织特异性,可用于体液性质鉴定。本研究以中国汉族的血液、精液、唾液、阴道分泌液和月经血等5种体液的大量群体样本为对象,改进体液斑痕的RNA提取方法,利用miRNA基因芯片筛选,确定具有鉴定意义的miRNA位点。通过定量PCR,获得位点的△Ct值(目标基因与内参基因的循环阈值的差值)。通过这些基础研究可以建立:1.基于2种特定位点的△Ct值的组合,构建二维组合鉴定系统;2.以特定位点的△Ct值构建进化树,构建进化树鉴定系统。利用两种系统的联合应用,对斑痕检材和混合检材进行特异性鉴定,可以解决法医相关性体液的性质鉴定。

结项摘要

生物性体液是最重要的物证检材,而它们常以斑痕形式存在。传统的鉴定方法不能实现体液性质的复合鉴定(即通过一次实验对多种体液进行性质鉴定)。.miRNA具有保守性和组织特异性,可用于体液性质鉴定。如果能找到具有体液组织特异性的miRNA位点,无疑为体液性质鉴定的方法开创了新的技术路线。.本研究以中国汉族的血液、精液、唾液、阴道分泌液和月经血等5种体液和皮屑拭子的大量群体样本为对象,利用miRNA基因芯片筛选,确定具有鉴定意义的miRNA位点。通过实时荧光定量PCR,获得位点的△Ct值。以此作为数据基础,从而构建二维组合鉴定系统和进化树鉴定系统,对斑痕检材和混合检材进行特异性鉴定,为解决法医体液性质鉴定做出一定的基础贡献和应用研究。主要取得以下学术成绩:.1、完成了法医相关的5种体液和皮屑拭子的大量群体样本收集,为后续研究做好样本基础。.2、利用生物信息学和miRNA基因芯片,筛选出具有鉴定意义的miRNA位点。然后对这些位点进行荧光定量PCR实验,得到位点的Ct值和△Ct值,为下一步研究奠定数据基础。.3、改进RNA提取方法,以此解决法医实践中斑痕检材的RNA难以提取的问题,为今后相关研究奠定了一定的基础。.4、筛选出一系列具有体液性质特异性的miRNA位点,对建立中国汉族人群体液鉴定miRNA基因库进行了基础性工作。.5、初步构建了体液性质鉴定的二维组合鉴定系统:建立了5种体液对应的多组miRNA位点系统(每组由特定的2个miRNA位点构成),以此进行体液鉴定。经过实践应用,初步确认该系统的可行性。为后续研究提供良好的基础。.6、初步构建了体液性质鉴定的进化树鉴定系统:建立了5种体液对应的多组NJ树系统,以此进行体液鉴定。经过实践应用,初步确认该系统的可行性。为相关研究提供新的研究方向。.7、筛选能够鉴别月经血与外周血的miRNA位点,并且以此构建血液类样本的性质鉴定miRNA策略,为今后该领域的应用提供基础性研究。.8、对实时荧光定量PCR的两种定量方法(Taqman探针和SYBR Green染料)进行了对比研究,以此探讨不同定量方法对miRNA体液鉴定的影响,为相关研究的完备性提供基础性补充。.总之,在该项目的资助下,课题组在国际法医遗传学主流杂志上共发表SCI论文5篇,参加2次高水平的国际会议,协助培养硕士研究生1名。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Micro RNA profiling for the detection and differentiation of body fluids in forensic stain analysis
用于法医染色分析中体液检测和区分的 Micro RNA 分析
  • DOI:
    10.1016/j.fsigss.2013.10.111
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    Forensic Science International: Genetics Supplement Series
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Bing Long;Kuanlin Liu;Weibo Liang;Lin Zhang
  • 通讯作者:
    Lin Zhang
SNP–STR polymorphism: A sensitive compound marker for forensic genetic applications
SNP-STR 多态性:法医遗传学应用的敏感复合标记
  • DOI:
    10.1016/j.fsigss.2013.10.106
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    Forensic Science International: Genetics Supplement Series
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    M.A. Rothschild;P. Bai;W. Liang;Lin Zhang
  • 通讯作者:
    Lin Zhang
Screening and confirmation of microRNA markers for distinguishing between menstrual and peripheral blood
用于区分经血和外周血的 microRNA 标记物的筛选和确认
  • DOI:
    10.1016/j.fsigen.2017.05.012
  • 发表时间:
    2017-09-01
  • 期刊:
    FORENSIC SCIENCE INTERNATIONAL-GENETICS
  • 影响因子:
    3.1
  • 作者:
    Li, Zhilong;Bai, Peng;Zhang, Lin
  • 通讯作者:
    Zhang, Lin
Influences of different RT-qPCR methods on forensic body fluid identification by microRNA
不同RT-qPCR方法对microRNA法医体液鉴定的影响
  • DOI:
    10.1016/j.fsigss.2015.09.117
  • 发表时间:
    2015-12-01
  • 期刊:
    FORENSIC SCIENCE INTERNATIONAL GENETICS SUPPLEMENT SERIES
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Li, Zhilong;Bai, Peng;Liang, Weibo
  • 通讯作者:
    Liang, Weibo

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  • 通讯作者:
    Bai Peng~(3) Chen Qian Liu Xinyu Li Feng (China Ac

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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