线粒体抗体阴性原发性胆汁性肝硬化的自身抗体筛选及应用研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81302591
项目类别：
青年科学基金项目
资助金额：
23.0万
负责人：
邓垂文
依托单位：
中国医学科学院北京协和医院
学科分类：
H1107.自身免疫性疾病
结题年份：
2016
批准年份：
2013
项目状态：
已结题
起止时间：
2014-01-01 至2016-12-31

项目参与者：
陈华；吴婵媛；张磊；马佳彬；徐涓娟；陈思；
关键词：
生物标志物原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体自身抗体

项目摘要

Primary biliary cirrhosis (PBC) is a progressive autoimmune liver disease characterized by the destruction of intra-hepatic small bile ducts. Laboratory diagnosis of PBC is mainly depended on detection of antimitochondrial antibody. PBC patients with negative AMA are diagnosed only if confirmed by liver biopsy. Since biopsy is risky, it's not so accepted by both doctors and patients. In order to explore a diagnosis related biomarker for PBC patients with negative AMA, proteomic technology, enrichment of antigen-antibody complex combining with high performance liquid chromatography - mass spectrometry technology were applied in this research. We firstly screen the possible autoantibodies for PBC patients with negative AMA, and then we verify the clinical performance of this biomarker. We believe this research will help to comprehensively promote the early diagnosis and treatment of PBC patients with negative AMA, improve patients' quality of life, and provide new threads for in-depth understanding of PBC.

原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis, PBC）是一类以肝内小胆管非化脓性改变为主要特征的自身免疫性肝病。PBC患者实验室诊断主要依赖抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibody, AMA）检测。AMA阴性的PBC患者则需通过肝脏病理活检方能确诊。由于后者具有一定的风险，难以为患者和医生接受。为寻找AMA阴性PBC患者诊断相关的自身抗体标志物，本次研究将应用蛋白质组学研究技术，抗原抗体复合物富集捕获与高效液相色谱-质谱联用技术，筛选相关标志物，再而验证这些自身抗体的应用于临床的效能。本项目的开展将有助于提高AMA阴性的PBC患者早期确诊率，实现患者早期治疗并提高其生活质量，为深入认识PBC提供新思路。

结项摘要

原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)是一类病因不明的自身免疫性肝病，其特征有肝门管区的淋巴细胞浸润，中小肝内胆管损伤和进展性疤痕，可最终发展为肝纤维化或肝衰竭。. 研究运用了抗原抗体复合物富集捕获与高效液相色谱-质谱联用技术。在AMA阳性与AMA阴性PBC患者的血清中共发现了1081个候选自身抗原。在这些候选自身抗原中，有371个抗原在AMA阳性和AMA阴性PBC之间具有统计学差异(p<0.05)，但这些蛋白质的差异倍数均小于1.5倍。随即我们采用生物信息学，对由371个差异蛋白所构成的候选自身抗原库进行深入分析以探索PBC的发病机制。. 在候选自身抗原库中，GO注释发现有多个蛋白分类发生了显著改变。如预期所示，线粒体相关生物学进程在GO分析中呈现高倍数富集状态，此外，B细胞活化正调控，以及吞噬细胞识别与吞噬相关蛋白亦亦表现为高倍数富集。此外，在候选自身抗原库中发现有两个蛋白质作用网络，对两个网络行GO注释分析，其中一个作用网络存在于线粒体，而另一个网络则存在于胞浆之中，包括核糖体，细胞膜，细胞核与外泌体等。这给予我们重要提示，参与了PBC发病机制的自身抗原不局限于线粒体中，应该在其他细胞器中进行更加深入的研究。为了验证本次研究数据的合理性和准确性，我们对研究数据进行了聚类分析。结果显示有两个明显簇，聚类簇1显示在AMA阴性PBC相关候选自身抗原多存在于B细胞活化正调控，以及吞噬细胞识别相关生物途径，聚类簇2则提示AMA阳性PBC相关候选自身抗原多存在于线粒体中。. 总之，我们的研究数据与目前PBC发病机制研究结果相符，证实了本次研究的可靠性。研究中新的发现提示我们AMA阴性PBC的发病机制在于B细胞活化正调控，以及吞噬细胞识别相关生物途径，这为后续的深入研究指明了方向。