玉米基于Ac/Ds转座子的激活标签突变体生成系的构建

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31271737
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    85.0万
  • 负责人：
    张方东
  • 依托单位：
    华中农业大学
  • 学科分类：
    C1307.作物基因组及遗传学
  • 结题年份：
    2016
  • 批准年份：
    2012
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2013-01-01 至2016-12-31

项目摘要

An artificial transposon Dissociation (Ds) element carries the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S enhancer will be inserted in maize Rsc gene. The construct based on skeleton vector pTF102 will be introduced into maize tissue culture by A.tumefaciens-mediated transformation. The positive plants will hybrid with maize inbreed T3301-56 which containing a activator transposase(Ac-Immobilized), then selfing and identify the homozygous plants. Then an activation-tagging Ac-Ds transposon system will be developed. After cultivation, purple grains from maize ear will be selected and yellow grains discarded. This Ac/Ds-based activation tagging system in maize(Zea mays. L) will be exploit to generate gain-of-function phenotype mutants for functional genomics research and for maize breeding.
将来源于CaMV35S启动子的增强子序列合成在玉米Ds转座子的左右两端重复序列中，这个包含有增强子序列的人工Ds转座子将插入在玉米Rsc基因之中，使Rsc失去活性。以上的所有DNA序列将构建在载体pTF102上。构建成功的转化质粒，由农杆菌介导转化玉米，得到的阳性转基因玉米材料与含有转座酶Ac的玉米自交系T3301-56杂交，在杂交后代中鉴定自交纯合的转基因材料，即为玉米基于Ac/Ds的激活标签突变体生成系。按照玉米生产的常规方法，大量种植激活标签突变体生成系，授粉自交结实。收集玉米果穗上大部分黄色籽粒中紫红色的籽粒，大量种植，观察植株的表型，自交保存，它们构成了玉米的激活标签突变体库。克隆分析插入标签的特异序列，总结该突变体生成系的规律，并从中筛选各种类型的功能获得型突变体，这些突变体材料可以用于玉米基因功能的研究和玉米育种。

结项摘要

项目成果

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其他文献

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  • 通讯作者：
    聂双喜
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  • 通讯作者：
    张方东
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  • 发表时间：
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
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  • DOI：
    10.13550/j.jxhg.20170841
  • 发表时间：
    2018
  • 期刊：
    精细化工
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    卜鑫;裴继诚;产慧芳;张方东;刘海棠;周志敏;甄小琴;王菁
  • 通讯作者：
    王菁

其他文献

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玉米全基因组的超表达突变体生成系统的构建与特性研究
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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