尿液exosome基因表达检测及其在肾脏纤维化诊断中的价值探讨

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基本信息

  • 批准号：
    81100544
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    23.0万
  • 负责人：
    吕林莉
  • 依托单位：
    东南大学
  • 学科分类：
    H0511.泌尿系统疾病研究新技术与新方法
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

慢性肾脏病（CKD）进展为终末期肾衰的关键是肾脏进行性纤维化，目前诊断肾脏纤维化（RF）主要依靠肾活检，临床尚无特异、敏感的无创性检测方法。我们前期的研究表明，尿液中存在与纤维化过程关联的基因标志物。尿液exosome不仅包含源细胞蛋白成分，而且还承载了丰富的基因表达信息,这种基因信息来自功能活性细胞且更为稳定，为研究尿液基因标志物提供了全新的平台。本研究将在前期对肾脏纤维化发生机制和尿液生物标志物研究基础上，通过对尿液exosome分离、基因检测相关影响因素的研究，建立稳定的尿液exosome分离和基因检测方法；通过对尿液exosome肾脏纤维化相关基因从基因芯片筛查到RT-PCR、临床病理学关联分析的验证研究，探讨尿液exosome基因表达在肾脏纤维化诊断中的价值，为临床早期、动态检测肾脏纤维化进展寻找新型生物标志物。

结项摘要

慢性肾脏病（chronic kidney disease, CKD）进展为终末期肾衰的关键是肾脏进行性纤维化，然而，目前临床在体无创检测肾脏纤维化仍十分困难。最新的研究发现，尿液exosome中包含了丰富的基因表达信息,为研究尿液生物标志物提供了全新的途径。本研究成功建立了尿液exosome分离、提取和鉴定方法，并对相关条件进行优化，对尿液exosome内mRNA, miRNA建立了具有高敏感性、高可重复性的定量检测方法；在此方法基础上，我们发现尿液exosome中的ACE2 mRNA在不同CKD分期病人中呈现不同水平，与肾小球硬化和肾脏功能密切相关，尤其是对已存在肾脏功能下降的病人；我们还发现，尿液exosome中足细胞相关基因CD2AP表达在CKD组显著下降，并与肾脏纤维化、蛋白尿和肾脏功能均密切相关；exosome是miRNA存在的主要形式，本项目通过筛查与肾脏纤维化密切相关miRNA的表达，发现其中miR-29c与肾脏功能和小管间质纤维化密切相关。本研究工作为肾脏纤维化生物标志物研究开辟了全新的研究方向和技术平台，所发现的exosome 内相关基因可能成为肾脏纤维化无创、动态监测的新型标志物。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（7）
专利数量（0）
CD2AP mRNA in urinary exosome as biomarker of kidney disease.
尿外泌体中的 CD2AP mRNA 作为肾脏疾病的生物标志物。
  • DOI：
    10.1016/j.cca.2013.10.003
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Clinica Chimica Acta
  • 影响因子：
    5
  • 作者：
    Lv LL;Cao YH;Pan MM;Liu H;Tang RN;Ma KL;Chen PS;Liu BC*
  • 通讯作者：
    Liu BC*
Isolation and Quantification of MicroRNAs from Urinary Exosomes/Microvesicles for Biomarker Discovery.
从尿液外泌体/微泡中分离和定量 MicroRNA，用于发现生物标志物。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    International Journal of Biological Sciences
  • 影响因子：
    9.2
  • 作者：
    Lv LL*;Cao Y;Liu D;Xu M;Liu H;Tang RN;Ma KL;Liu BC*
  • 通讯作者：
    Liu BC*
尿液exosome:肾脏病研究的新载体
  • DOI：
    10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2013.06.038
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    国际泌尿系统杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吕林莉;刘必成
  • 通讯作者：
    刘必成
MicroRNA-29c in urinary exosome/microvesicle as a biomarker of renal fibrosis.
尿液中的 MicroRNA-29c
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    American Journal of Physiology - Renal Physiology
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Lv LL;Cao YH;Ni HF;Xu M;Liu D;Liu H;Chen PS;Liu BC*
  • 通讯作者：
    Liu BC*

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抗体的选择——从传统免疫分析到蛋白质芯片
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    刘必成
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    WANG Li-mei

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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