TRB3对肝癌细胞凋亡的影响及其机理的研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81072007
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    33.0万
  • 负责人：
    孟祥军
  • 依托单位：
    上海交通大学
  • 学科分类：
    H1814.肿瘤化学药物治疗
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

TRB3是内质网应激信号途径的重要分子，在诱导细胞凋亡过程中起着重要的作用，然而其发挥作用的具体机制尚不清楚。我们在研究钌类化合物诱导细胞凋亡的过程中发现：做为CHOP的下游信号分子，TRB3的表达能够诱导肝癌细胞的凋亡；进一步研究发现，TRB3可致肝癌细胞的ROS产生增加，并导致肝癌细胞线粒体膜电位降低，然而其机理尚未完全阐明。本研究在此工作的基础上，设想TRB3通过影响细胞线粒体ROS的产生及抑制Akt途径的促凋亡功能而诱导细胞凋亡；通过采用CO-IP、Western blot及siRNA等多项技术，研究TRB3对PI3K/Akt信号途径及ROS信号途径的影响与作用，包括通过何种凋亡机理最终诱导了肝癌细胞的凋亡。课题的完成将可能发现新的促细胞凋亡的信号分子，为肿瘤的治疗提供可能的靶标。

结项摘要

1应用Thapsingargin诱导HepG2细胞的ER Stress，以qPCR和Westernblot检测内质网应激信号分子TRB3、ATP6、XBP1、CHOP、ATF4、及Akt mTOR等相关基因，在应激状态下TRB3对ER Stress基因表达以及对Akt信号途径有明显的影响，.2 以TRB3表达载体转染HepG2细胞，再以Thapsingargin，检测上述相关基因的表达状况，观察TRB3过表达对HepG2细胞生长及凋亡的影响；RNAi分别沉默TRB3、CHOP及Akt，其明显影响细胞生长（MTT）及细胞凋亡的影响..3 以Cisplatin诱导HepG2细胞耐药性的产生（97H，97H-S），以定量PCR及Western blot检测ROS相关基因在耐药细胞HepG2res 中TRB3表达的变化，MTT实验发现，采用RNAi沉默TRB3后能恢复细胞对化疗药物的敏感性，Western blot 进一步研究发现Akt,ASK1,MKK,JNK等在耐药细胞株中表达增加，CHOP表达降低。

项目成果

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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