对虾白斑综合症病毒（WSSV）入胞机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
41176114
项目类别：
面上项目
资助金额：
82.0万
负责人：
刘海鹏
依托单位：
厦门大学
学科分类：
D0604.生物海洋学与海洋生物资源
结题年份：
2015
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
彭会；陈芳奕；乔琨；张民；陈荣元；张秋霞；张亚群；林智勇；陈慧芸；
关键词：
病毒入侵对虾白斑综合症病毒 Hpt干细胞螯虾造血组织干细胞 WSSV

项目摘要

白斑综合症病毒（WSSV）是目前侵害对虾等甲壳动物的首要病毒性病原，由于缺少可稳定培养的对虾细胞系，我们对WSSV侵入宿主细胞的过程仍不清楚，严重限制了针对病毒入侵过程来设计新型抗病毒药物。WSSV对螯虾造血组织（Hpt）干细胞具有高度感染嗜性，本项目拟在已成功分离可稳定培养的螯虾Hpt干细胞、利用差异基因筛选技术获得366个WSSV感染后表达显著上调的细胞基因等研究基础上，以螯虾Hpt干细胞作为WSSV体外感染的有效宿主，通过蛋白晶体结构/同源建模分析、宿主基因功能阻断、过表达显性负突变体构建、细胞"脂筏"结构鉴定和电镜等技术，重点考察差异表达因子中的层粘连蛋白受体和网格蛋白依赖型内吞是否参与WSSV入胞过程，并与其他细胞膜活动（如巨胞饮、膜穴样凹陷依赖型内吞等）可能介导的WSSV入胞途径进行比较，从细胞不同膜活动过程来解析WSSV入胞的分子机制，为WSSV防治提供理论依据和有效靶位。

结项摘要

白斑综合症病毒（White spot syndrome virus，WSSV）是对虾等多种甲壳动物包括螯虾的主要病原。由于对虾等甲壳动物细胞系研究相对滞后，目前人们对WSSV感染致病机制尤其是其入胞机制认识尚浅。螯虾造血组织（hematopoietic tissue，Hpt）干细胞是研究WSSV感染的有力模型，我们利用该原代培养细胞模型研究发现WSSV可利用包括网格蛋白介导的内吞、巨胞饮和膜穴养凹陷介导的内吞等多种内吞途径入侵宿主细胞；此外，自噬可能也参与WSSV入胞过程。通过对一关键自噬相关蛋白Cq-GABARAP的功能研究，我们发现重组表达Cq-GABARAP（rCq-GABARAP）能够结合病毒囊膜蛋白VP28，促进WSSV进入宿主细胞，具体机制可能涉及自噬及其对网格蛋白介导的内吞的上游Rac1信号通路的调控。与内吞途径入胞不同的是，rCq-GABARAP并未增加病毒复制增殖，相反，感染后6 h的检测结果显示rCq-GABARAP明显抑制病毒基因转录复制，该现象可能与rCq-GABARAP引起入胞病毒汇集成团有关。综上，本研究为揭示WSSV感染入胞及其调控机制奠定基础，为抗WSSV药物研发提供重要理论依据。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（5）

专利数量（0）

Proteomic analysis by iTRAQ in hematopoieticstem cells from red claw crayfish Cheraxquadricarinatus at both early and late stages of infection by white spotsyndrome virus

利用 iTRAQ 对白斑综合症病毒感染早期和晚期红螯虾造血干细胞进行蛋白质组学分析

DOI：
10.1016/j.jinsphys.2012.05.003
发表时间：
2016
期刊：
Fish and Shellfish Immunology (2016,In press) DOI: 10.1016/j.fsi.2016.01.035
影响因子：
--
作者：
Wang K-j;Wang K-j;Liu H-p;Liu H-p
通讯作者：
Liu H-p

Proteomic analysis by iTRAQ in hematopoieticstem cells from red claw crayfish Cheraxquadricarinatus at both early and late stages of infection by white spotsyndrome virus

利用 iTRAQ 对白斑综合症病毒感染早期和晚期红螯虾造血干细胞进行蛋白质组学分析

DOI：
--
发表时间：
2016
期刊：
Fish and Shellfish Immunology (2016,In press) DOI: 10.1016/j.fsi.2016.01.035
影响因子：
--
作者：
Wang K-j;Wang K-j;Liu H-p;Liu H-p
通讯作者：
Liu H-p

Metabolic Product Response Profiles of Cherax quadricarinatus towards White Spot Syndrome Virus Infection

红螯螯虾对白斑综合症病毒感染的代谢产物反应曲线